实验二 细菌的单染色与革兰氏染色资料.pptVIP

实验二 细菌的单染色及革兰氏染色 （一）简单染色法 目的要求 学习微生物涂片、染色的基本技术，掌握细菌的简单染色法； 巩固显微镜（油镜）的使用方法和无菌操作技术。 基本原理 借助物理因素（如：细胞及细胞物质对染料的毛细现象、渗透、吸附作用等）和化学因素（如：正负离子之间的相互吸引等）的作用而进行的。 实验器材 菌种 藤黄八叠球菌 染色剂 草酸铵结晶紫染液 番红染液 仪器或其他用具 显微镜、酒精灯、载玻片、接种环、无菌水等。 实验结果 根据观察结果，绘出细菌形态图。 思考题（P76五、2. （１）（2）（3）） 在进行细菌涂片时应注意哪些环节？ 细菌制片时为什么要进行加热固定？在加热固定时应注意什么？ 为什么要求制片完全干燥后才能用油镜观察？ （二）革兰氏染色法 目的要求 学习并初步掌握革兰氏染色法； 了解革兰氏染色法的原理及其在细菌分类鉴定中的重要性。 实验器材 菌种 枯草芽孢杆菌12-18h营养琼脂斜面培养物 大肠杆菌约24h营养琼脂斜面培养物 染色剂 草酸铵结晶紫染液 卢戈氏碘液 95%乙醇 番红染色液 仪器或其他用具 显微镜、酒精灯、载玻片、接种环、无菌水等。 实验结果 列表说明你所观察到的细菌形状、颜色和革兰氏染色反应。 思考题 你认为哪些环节会影响革兰氏染色结果的正确性？其中最关键的环节是什么？ 在革兰氏染色时，为什么特别强调菌龄不能太老，用老龄细菌染色会出现什么问题？ 你认为革兰氏染色中，哪一个步骤可以省去而不影响最终结果？在什么情况下可以采用？ 操 作 步 骤 涂 片 干 燥 固 定 染 色 镜 检 水 洗 干 燥 操 作 步 骤 采用三区涂片法制片 大肠杆菌 枯草芽孢杆菌 大肠杆菌与枯草芽孢杆菌 混合涂片 操 作 步 骤 大肠杆菌与枯草芽孢杆菌混合涂片油镜下形态（革兰氏染色） 大肠杆菌 萌发芽孢的枯草芽孢杆菌 结果（Ｇ＋、Ｇ－） 颜 色 形 态 菌 种