猪尿和猪肝中克伦特罗ELISA方法的建立及初步应用.pdfVIP

- 279 一 江苏农业科学 2012 年第40 卷第 1 期 王帅兵，左伟勇，洪伟鸣，等.猪尿和猪肝中克伦特罗 ELISA 方法的建立及初步应用 [JJ. 江苏农业科学，2012 ， 40 (1) :279 - 282. 猪尿和猪肝中克伦特罗 EUSA 方法的建立及初步应用 王帅兵1 ，左伟勇13 ，洪伟鸣1 气袁宗辉3 ，朱善元1 ， 2 (1.江苏畜牧兽医职业技术学院，江苏泰州 2253∞; 2. 江苏省兽用生物制药高技术研究重点实验室，江苏泰州 2253∞; 3. 农业部兽药残留基准实验室/农业部食品安全评价重点开放实验室，湖北武汉 43∞70) 2 摘要:以自制的单克隆抗体为基础，优化间接竞争 EUSA 条件，建立标准曲线 y = - 24. 778. 306x + 53. 744 , r = 0.9934 ，线性范围为0.1 -27μglL， IC 1. 8μglL(n =25) ，最低检测限(LOD) 为 0.1μ，glL。尿液经叔丁基甲酷提 为 5o 取，回收率为68.24% -1∞.73% ;肝脏用盐酸水解，加 KH P0 缓冲液(pH 值 3.0) 提取，过 C 柱净化，回收率为 2 4 18 80.45% -98.45%;变异系数均小于20% ，尿液和肝脏中的 LOD 为0.3μ， glL、0.3μglkg。用该方法检测喂药动物尿 液和肝脏中的克伦特罗残留，特异性良好，适用于猪尿和肝脏中克伦特罗残留筛选。 关键词:克伦特罗; ELISA; 猪尿;猪肝;优化;应用 中圄分类号: S859.84 文献标志码:A 文章编号:1∞2 -1302(2012)01 -0279-04 克伦特罗(clenbuterol ,CL) 是一种β- 肾上腺素受体激动 低，是目前进行宰前及屠宰现场检测克伦特罗的筛选法。现 剂，对食品动物具有促生长和提高瘦肉率的作用，但易残留在 有试剂盒大多以多克隆抗体为基础，特异性不理想。为提高 动物组织中使消费者发生急性中毒。欧盟[1] 和美国[2] 均禁 检测特异性和检测效率，降低检测成本，本研究以单克隆抗体 止将该药作为饲料添加剂应用于食品动物，我国也于2∞2 年 为基础，建立猪尿液和肝脏中克伦特罗残留的检测方法，并通 将其列入禁用药名单。然而，由克伦特罗残留引起的人类食 过动物试验进行考核，为研制克伦特罗快速检测试剂盒奠定 物中毒事件时有发生[Lg] ，因此灵敏、快速、简便、实用的检测 坚实基础。 方法是有效监测克伦特罗滥用和残留的基本手段。克伦特罗 1 材料与方法 残留检测方怯主要有仪器方法和 EUSA 方法。与仪器方法 相比，EUSA 灵