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琼脂及琼脂糖的区别
琼脂和琼脂糖
做生物实验的人对琼脂和琼脂糖一定都不会陌生。不过要让你说出它们两者的区别,我想不少人都会支支吾吾。反正不一样呗,培养基用的是琼脂粉,电泳用的是琼脂糖。具体有啥学问,听我一一道来。
先来说说琼脂,它的英文名为agar。这个词来源于马来语的agar-agar,意思是胶状物。中国人亦称为洋菜或冻粉。日本人称之为寒天(kanten),因为它在冬天收获。台湾人叫它菜燕,和燕窝的质感差不多。韩国人的叫法是
琼脂作为一种独特的食品在我国已经有悠久的历史。它是从大型海洋藻类石花菜、紫菜、江篱等提取分离制成的,广泛应用于食品和生化等行业。我们常吃的果冻、冰淇淋、糕点、软糖、罐头、八宝粥中都含有琼脂。我国的山东、福建、广东、海南等拥有优越的海洋资源和气候条件,适宜大型海洋藻类的生长,是生产琼脂的主要地区,产品远销世界各地。
琼脂是由琼脂糖(agarose)和琼脂果胶(agaropectin)组成的。琼脂糖是线性的多聚物,基本结构是1,3连结的β-D-半乳呋喃糖和1,4连结的3,6-脱水α-L-半乳呋喃糖。琼脂果胶是由许多更小的分子组成的异质混合物。它们的结构相似,但带硫酸根和羧基组分,凝胶能力差。
琼脂糖在水中一般加热到90以上溶解,温度下降到35-40时形成良好的半固体状的凝胶,这是它具有多种用途的主要特征和基础。琼脂糖凝胶性能通常用凝胶强度表示。强度越高,凝胶性能越好。质量较好的琼脂糖强度通常在1200克/cm2以上(1%胶浓度)。琼脂糖的凝胶性是由存在的氢键所致,凡是能破坏氢键的因素都能导致凝胶性的破坏。
琼脂糖具有亲水性,并几乎完全不存在带电基团,对敏感的生物大分子极少引起变性和吸附,是理想的惰性载体。在琼脂糖制备过程中需要把琼脂果胶尽量去除,否则琼脂糖有可能存在极微量硫酸根和丙酮酸取代电离基团,就会造成电内渗(EEO),电内渗对质点的移动产生影响。质量较好的琼脂糖硫酸根含量比较低,通常在0.2%以下,电内渗比较小,通常在0.13以下。这也就是琼脂糖比琼脂贵那么多的原因了。
1937年荒木第一次从琼脂中分离出琼脂糖,但直到1961年Hjertin首先发现了琼脂糖优异的使用性能后才引起了越来越多的关注,并开始工业生产。目前,琼脂糖广泛应用于临床化验、生化分析和生物大分子物质的分离等领域。
现在实验室中最常用的琼脂糖应该是西班牙biowest出产的。不过既然我国有这么丰富的海洋资源,就没理由让外国货专美。厦门太阳马公司最近成功研制出电泳级的Fargarose?琼脂糖,完全可以与之媲美。我们将其主要的参数如凝胶强度和电内渗与biowest的琼脂糖进行了比较,发现同是1%的凝胶,Fargarose琼脂糖的凝胶强度(1200 g/cm2)远远大于biowest的750 g/cm2,而EEO(0.13)也小于biowest的0.15。而其价格(100g 230元)又低于biowest(100g 约300元)。不愧是国际品质,本土价格。
产品特性:透明度好:溶解快,胶液清澈透明高强度:保证凝胶的强度与弹性,即使是低浓度的凝胶也不易发生破碎。低电内渗:减少对电泳质迁物迁移与分离的影响。极低的背景:没有其它荧光物质干扰,泳带与背景黑白分明,拍摄的图片效果好。没有核酸酶和蛋白酶。
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