组织样液检测重点.pptVIP

检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质 1、实验原理：——颜色反应 还原糖 +斐林试剂 砖红色沉淀 脂肪 +苏丹Ⅲ染液 +苏丹Ⅳ染液 橘黄色 红色 淀粉 +碘液 蓝色 蛋白质 +双缩脲试剂 紫色 某些化学试剂能够使生物组织中的有关有机化合物产生特定的颜色反应。 常见的还原糖： 葡萄糖、果糖、 麦芽糖、乳糖、 半乳糖 1.怎样配制斐林试剂？ 用浓度为 0.1g/ml NaOH(甲液) 与等量的0.05g/ml CuSO4 (乙液) 混合均匀而成。 NaOH + CuSO4 Cu(OH)2 蓝色沉淀 + … … Cu(OH) 2 + 还原糖 Cu 2 O 砖红色沉淀 + … … 问题思考 2. 为什么斐林试剂可检验还原糖的存在？ 斐林试剂的本质是Cu(OH)2 的悬浊液，还原糖把 Cu(OH)2 还原成Cu 2 O 沉淀。 3.为什么要用新配制的试剂？ 因为斐林试剂稳定性较差，要现用现配。 斐林试剂 双缩脲试剂 甲液 乙液 A液 B液 成分 质量浓度： 0.1g/mL的 NaOH溶液 质量浓度： 0.05g/mL 的CuSO4溶液 质量浓度 为0.1g/mL 的NaOH溶 液 质量浓度 0.01g/mL 的CuSO4溶 液 鉴定物质 还原糖 蛋白质 添加顺 序方法 甲乙液等量混合均匀后注入 先注入A液1ml摇匀，再注入B液4滴摇匀 反应条件 水浴加热 不加热 反应现象 砖红色沉淀 紫色反应 斐林试剂与双缩脲试剂的异同分析 4、实验选材： 实验选材应注意什么问题？能不能选用深色的实验材料？ （1）材料本身应为白色或近于白色，以免对实验结果产生干扰； （2）材料应富含还原糖、脂肪或蛋白质等相关物质，使现象明显。 例、西瓜中富含果糖，甘蔗中富含蔗糖，可否用作检测还原糖的材料？试说明原因。 （一）还原糖的鉴定 1、常用材料：苹果或梨的匀浆 2、试剂：婓林试剂 (甲液: 0.1g/ml的NaOH 乙液: 0.05g/ml的CuSO4 ) 还原性糖的检测(A为实验组；B为对照组） 浅蓝 棕色 砖红色 注意事项： ①还原糖有： ② ③必须 颜色变化： 葡萄糖，果糖，麦芽糖，半乳糖，乳糖 浅蓝色 棕色 砖红色 用水浴加热（50℃—65℃） 甲乙液必须等量混合均匀后再加入样液中, 现配现用。 （2）蛋白质的鉴定 常用材料： 试剂： 双缩脲试剂(A液: 0.1g/ml的NaOH B液: 0.01g/ml的CuSO4 ) 豆浆，鸡蛋清，牛奶 制备组织样液：鲜肝提取液或豆浆滤液 呈色反应： 结论：说明组织样液中存在蛋白质 蛋白质（鸡蛋清稀释液）的检测 注意事项： ①先加 ，再加 ② 鉴定前，留出一部分组织样液，以便 颜色变化： 变成紫色 A液1ml B液4滴 对比 橘黄 （三）脂肪的鉴定方法 去浮色 低倍 高倍 橘黄 注意事项： ①切片要薄，如厚薄不均就会导致观察时有的地方清晰，有的地方模糊。 ②酒精的作用是： ③ ④ 不同的染色剂所需的染色时间不同 颜色变化： 洗去浮色 橘黄色或红色 需使用显微镜观察 ☆迁移训练5： 在人的唾液中加入双缩脲试剂，其结果是（ ）　　 A．产生气泡 B．溶液呈蓝色 C．溶液呈紫色 D．产生砖红色沉淀 C 大量元素 微量元素 无机盐 脂质 核酸 斐林 砖红色 双缩脲 紫色 橘黄色 （红色） 碘液 蓝色