微流控芯片技术在蛋白质分析中应用进展.pdfVIP

维普资讯 第l9卷第4期 化 学 研 究 与 应 用 Vo1．19．No．4 2007年 4月 ChemicalResearchandApplication Apr．，2007 文章编号：1004-1656(2007)0443345434 微流控芯片技术在蛋 白质分析中的应用进展 蓝 悠，李全文，陈缵光 (中山大学药学院，广东 广州 510089) 摘要：近年来，微流控芯片技术取得了显著的发展。随着微电子及微机械等制作技术的不断进步，高通量、高 效、快速、低成本的微流控分析芯片在蛋白质和多肽分析方面获得了令人瞩目的成果。本文主要介绍了微流 控芯片在蛋白质组学分析研究的应用和发展。引用文献52篇。 ‘ 关键词：微流控芯片；微芯片；蛋白质分析 中图分类号：0629．73 文献标误码：A 随着人类基因组测序计划的完成，分子生物 白芯片在技术上比较成熟，已经开始向商业和临床应 学已经进入蛋 白质组学的研究阶段…。为了在蛋 用发展 J。 白质水平上对各种生物学功能、各种生理、生化过 微流控芯片的迅速发展需要灵敏的检测形式 程以及各种疾病发生的机理更全面的了解，人们 与之相适应。由于芯片的检测区域非常微小，分 的研究重点逐渐转向于用各种基于蛋 白质的检测 离速度快，对检测器的灵敏度和响应速度要求很 手段来研究蛋白质的结构、功能、翻译后修饰 ( ． 高 ¨引。因此基于不同检测原理的众多检测方法 Ms)以及蛋 白质之间的相互作用 ．3J。蛋 白质分 都被运用在微流控芯片系统的研究中，按照其原 析对重大疾病机理、疾病诊断与治疗、药物筛选等 理可以分为光学检测法、电化学检测法和质谱检 方面的研究有重要意义，其最基本的研究任务是 测法等。 从生物样品中分离和鉴定蛋 白质。蛋 白质检测分 析最常用的方法是先从细胞 中提取蛋 白质，再通 1 光学检测法 过双向凝胶电泳 (2一DGE)分离生物样品中的特 定蛋白质，然后用荧光扫描或质谱 (MS)等方法检 光学检测法又分为荧光检测法、吸收光度检 测和分析，从而得到蛋白质的定性及定量数据 J。 测法、化学发光检测法等。其中荧光检测法，尤其 这些传统的技术过于繁琐、样品消耗量大、灵敏度 是激光诱导荧光检测，因其线性范围宽，灵敏度极 不高，无法满足蛋白质组学对分析系统快速、集 高 (可达到 10一mol／L～10 moL／L，甚至能进行 成、高通量、高灵敏度的需求。而微流控芯片 (Mi． 单分子检测)，是应用最早且至今仍应用广泛的光 crofluidicChip)的研究和发展给蛋 白质分析开拓 学检测方法。但由于只有部分的化合物能产生荧 了新思路 。 光，必须用荧光试剂对其进行衍生，因此在激发光 微流控芯片是利用微电子机械系统(Micro—elec． 源波长和荧光试剂选择上受到了限制。 tro—mechanicalSyster~，Ⅷ )技术在玻璃、硅和有机 林炳承 ¨等用PVA修饰氧化后的PDMA芯 高分子聚合物 等基片表面，构建微管、微池、微泵等 片通道表面，使不亲水的通道表面变成亲水，并发 分析单元和系统07．引，或基于芯片毛细管电泳技术，以 现 100％ 水解的PVA吸附作用和电渗流都较 实现样品进样、生物和化学反应、预浓缩、分离和检测。 88％水解的PVA和未修饰的PDMA表面小。在 具有快速、高效、高通量、低成本、低样品量、可批量分 用覆盖了3层 PVA涂层的PDMA芯片分离，用荧 析等 ”J，是蛋白质研究的优良I-| 其中有些蛋 光标记的碱性蛋白(溶菌酶，核糖核酸酶)时获得 收稿日期：2006-01-25