示差分光与光度法测定水样中非那西汀的含量11.pptVIP

示差分光光度法测定水样中非那西汀的含量 实验目的 1、通过标准曲线的绘制及样品溶液的测定，了解示差分光光度法的原理及特点 2、掌握UV-2450型紫外-可见分光光度计的使用方法 实验原理 一、紫外－可见分光光度法基本原理 二、分光光度计基本组成及UV-2450型紫外－可见分光光度计操作规程 三、示差分光光度法的原理 一、紫外－可见分光光度法基本原理 紫外-可见分光光度法是指利用紫外-可见吸收光谱对物质进行定性和定量分析的方法。 紫外-可见吸收光谱属于分子吸收光谱，由分子的外层电子跃迁产生。其中 可见吸收光谱：波长范围400?750 nm ，主要用于有色物质的定量分析。 紫外吸收光谱：波长范围200?400 nm（近紫外区） ，可用于结构鉴定和定量分析。 物质的结构不同，紫外吸收光谱的形状不同，据此可进行结构鉴定。 例如: 不饱和脂肪族化合物在175~200 nm处有吸收。 芳香族化合物的苯环在紫外区有三个吸收峰， λmax = 250 nm，。 定量分析依据朗伯-比尔定律： UV-2450型紫外－可见分光光度计 二、分光光度计的基本组成及UV-2450型紫外－可见分光光度计操作规程 操作规程简介 1.打开电源开关，打开电脑及软件，进入自检界面。 2.单击确定开始自检，自检过程中不得打开样品室盖。 3.完成自检后，单击波长扫描按钮，选择“方式”，设定波长及测量方式（Abs） 4.将参比溶液放入参比池中，另一参比液放入样品池第一池内。点击自动清零键清零。 5.取出样品池中参比，放入测量液，进行全波长扫描，找出最大吸收波长。 6.取出测量液，将标准曲线的五个试样放入测量池中，打开定量分析界面，设定波长和测量方式Abs，测定各点吸收值，绘图。 7.放入待测样品，测定。 三、示差分光光度法原理 示差法标尺扩展原理 1. 示差分光光度法的测定步骤： 1）采用浓度为cs的标准溶液为参比溶液; 2）测定一系列Δc已知的标准溶液的相对吸光度(ΔA)； 3）绘制ΔA-Δc工作曲线； 4）由测得试样溶液得相对吸光度ΔA，从工作曲线上求出Δc，根据cx＝cs+Δc即可求出试样浓度cx 试剂与器材 UV-2450紫外-可见分光光度计， 石英比色皿（1cm）， 容量瓶（50ml）， 移液管（1ml、10ml）， 未知样品液。 实验方法及步骤 1.标准溶液的配制 非那西汀标准溶液（100μg/ml）：准确称取非那西汀0.0500g于小烧杯中，加少许乙醇溶解，转移到500ml容量瓶中，用蒸馏水稀释至刻度，摇匀备用 2.吸收曲线绘制 移取5.00ml非那西汀标准溶液于50ml容量瓶中，蒸馏水稀释至刻度，摇匀。以蒸馏水为空白，进行全波长扫描，绘制吸收曲线，找出最大波长。 3. 绘制工作曲线 分别取非那西汀标准溶液5mL，6mL，7mL，8mL，9mL，10mL分别于6 个50ml容量瓶中，用蒸馏水稀释至刻度，以第一个溶液为参比，于最大波长处测定吸光度值，以ΔA对Δc作图绘制工作曲线。 4.样品测定 取一定体积样品溶液（浓度在40-60μg/mL）于50mL容量瓶中，于最大吸收波长处测定吸光度值。 数据处理 1. 绘制非那西汀的吸收曲线 2. 绘制工作曲线 3. 在工作曲线上查出未知样中非那西汀的浓度Δc 4. 计算未知样中非那西汀的浓度cx 5.完成实验报告并交给指导教师。 * * 指导教师 权新军 Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 As