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第九章 分光光度法简述 主讲：陈友 琼州学院生物科学与技术学院 2009/11/02 Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. 第一节 基础知识 一、光的性质 光是一种电磁波。根据波长不同，光学光谱可分为：紫光（10nm-400nm）、可见光区（400nm-760nm）、红外区（760nm-300µm）。 白光为复合光，可分为红、橙、黄、绿、青、蓝、紫七种颜色的光。 若两种适当颜色的单色光按一定强度比例混合后成为一种白光，则这两种单色光称为互补色光。 Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. 二、溶液对光的选择性吸收及溶液的呈色 当一束白光通过某溶液时，由于溶液选择性地吸收了可见光域中某波段的光，而使溶液呈不同颜色，与吸收光颜色互补。 例： 硫酸铜水溶液呈蓝色是因为吸收白光中的黄色呈其补色。 高锰酸钾水溶液呈紫色是因为吸收白光中的绿色呈其补色。 Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. 溶液的颜色和吸收光颜色的关系 Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. 吸收曲线的讨论： （1）一种吸光物质对不同波长的光吸收程度不同。吸光度最大处对应的波长称为最大吸收波长λmax 。 吸收曲线是定量分析中选择入射光波长的重要依据。 （2）同一种物质浓度不同，其吸收曲线形状相似λmax不变。 在λmax处，吸光度A正比于浓度C。测定最灵敏 （3）吸收曲线可以提供物质的结构信息，并作为物质定性分析的依据之一。 （4）从吸收曲线形状可以解释物质的颜色。物质的颜色与吸收光颜色互为互补色。 Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. 光的互补：蓝 黄 Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. 第二节 光度分析法的基本原理 一、光度分析法： 在光谱分析中，依据物质分子对光的选择性吸收的特性而建立起来的分析方法称为光度分析法 主要有 红外吸收光谱：分子振动光谱，吸收光波长范围800nm50m 。 主要用于有机化合物结构鉴定。 紫外吸收光谱：电子跃迁光谱，吸收光波长范围200400 nm（近紫外区）。 可用于结构鉴定和定量分析。 可见吸收光谱：电子跃迁光谱，吸收光波长范 围400800nm ，主要用于有色物质的定量分析。 Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. 吸光光度法的特点： （1）灵敏度高； （2）准确度高； （3）操作简便、快速； （4）应用广泛。 Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. 二、朗伯—比耳定律朗伯-比尔定律是紫外-可见分光光度法的理论基础。 朗伯-比尔定律：当一束平行单色光通过含有吸光物质的稀溶液时，溶液的吸光度与吸光物质浓度、液层厚度乘积成正比，即 A=lg =εbc 式中：A 为吸光度； ε摩尔吸光系数，单位L/mol