第五章 子胂外-可见吸光光度法.pptVIP

第五章;化学分析：常量组分(1%), Er : 0.1%-0.2% 依据化学反应, 使用玻璃仪器 ;仪器分析方法分类;吸光光度法 基于被测物质的分子 对光 具有选择吸收的特性而建立的分析方法。;一、光的基本性质; h－普朗克(Planck)常数 6.626×10-34J·s E－光量子具有的能量 单位：J(焦耳)，eV(电子伏特) 1eV=1.602×10－19 J;结论:一定波长的光具有一定的能量，波长越 长(频率越低)，光量子的能量越低. 单色光：具有相同能量(相同波长)的光. 混合光：具有不同能量(不同波长)的光复合在 一起. 例如白光.;?;二、物质对光的选择性吸收;?/nm;价电子相对于原子核的运动--电子能级; 能级差：1-20 ev；吸收波长：1.25-0.06 ?m； 紫外-可见光谱或电子光谱。 2. 原子核在其平衡位置附近的相对振动--振动能级; 能级差：0.05-1 ev；吸收波长：25-1.25 ?m； 红外光谱或分子振-转光谱。 3. 分子本身绕其重心的转动--转动能级. 能级差：0.005-0.05 ev；吸收波长：250-25 ?m； 远红外光谱或分子转动光谱。;三、定性分析与定量分析的基础;§ 5-2 光的吸收定律—郎伯-比耳定律;一、郎伯-比耳定律;朗伯定律:(1760) A?b 当入射光的?、吸光物质的c一定时，溶液的吸光度A与液层厚度b成正比.;意义：当一束平行单色光通过均匀、透明的、非散射的吸光物质时，其吸光度与溶液液层的厚度和浓度的乘积成正比。;吸光度与透光度;吸光系数;溶液浓度的测定;二、偏离郎伯-比耳定律的原因;§ 5-3 紫外-可见吸光光度计;Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd.;Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd.;紫外-可见分光光度法, UV-VIS;吸光分析法的仪器简介;氙灯;棱镜：依据不同波长光通过棱镜时折射率不同;光栅：在镀铝的玻璃表面刻有数量很大的等宽度等间距条痕(600、1200、2400条/mm )。 利用光通过光栅时发生衍射和干涉现象而分光。;单光束分光光度计;吸光光度法的灵敏度与准确度;对摩尔系数的理解一;对摩尔系数的理解二;影响准确度的因素;10;§ 5-4 实验条件的选择;??量条件的选择; 用参比溶液调T=100%（A=0），再测样品溶液的吸光度，即消除了吸收池对光的吸收、反射，溶剂、试剂对光的吸收等。;参比溶液的选择;吸光光度法分析条件的选择;显色剂与显色反应 ;显色反应的选择;酸度的选择;酸度的选择;以;显色剂的用量;c(R);温度的选择;测定中的干扰以及消除方法;§ 5-5 吸光光度法应用示例;纯物质或共存物质不干扰; κxl1, κyl1, κxl2, κyl2由x,y标液 在?1, ?2处分别测得.;吸光光度法在生物学中的应用