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MRD理想的检测方法: 活检组织的PCR产物克隆, 对连接区进行测序, 再设计病人特异的引物做real-PCR进行MRD的评价 应用策略 采用所有引物组,工作量大,不实用,没有必要, 有交叉和重叠 合理的应用策略——以最少的引物组最大可能地检测克隆性 Suspected B-cell Proliferations Suspected Lymphoid Proliferations of unknown origin (B or T) Suspected T-cell Proliferations TCRγδ+ Proliferations or immature T-cell IGH (VH-JH) IGK Preferably with No clonality but still suspected IGH (DH-JH) Preferably with IGL Clonal (generally multiiple Clonal results) Clonal No evidence of clonality TCRB Preferably with TCRG TCRG TCRD and Results should be considered in the context of all available clinical, histological and immunophenotypic data Van Krieken, et al. Leukemia 2007;21:201-206 Suspected B-cell Proliferations Suspected Lymphoid Proliferations of unknown origin (B or T) Suspected T-cell Proliferations IGHB+IGKA+B Preferably with No evidence 0f presence of clonal B/T population in the samele IGHB+IGKA+B IGHA+C+D IGL+IGHE TCRGA+B TCRBA+B TCRBA+B+C TCRBc +TCRD TCRBC+TCRD TCRαβ TCRγδ If not clonal If not clonal If not clonal Liu et al. British J Haematol 2007;138:31-43 Lineage unknown 1. 克隆性不等于恶性: 有些良性病变有时也有克隆性重排 CD8+(有时CD4+) T 细胞增生症 良性单克隆性r球蛋白病 EBV阳性的淋巴细胞增生 (AILT) 自身免疫性疾病(Sjogren 综合症,风湿性关节炎) 免疫缺陷状态(先天性,移植后,HIV感染) 免疫调节异常疾病(Castleman 病) 皮肤异常病变(淋巴瘤样丘疹病,急性苔藓样糠疹) 结果的解释和注意事项 30例LyP病例TCR基因重排总体阳性率80% 20例CALCL病例TCR基因重排总体阳性率100%, 两组病例TCR基因重排阳性率无统计学差别(P0.05) 表明TCR基因重排在LyP和CALCL的鉴别中无应用价值。 必须结合临床病史 2.Ig和TCR基因重排不一定是谱系的标志: 某些T、B淋巴瘤有基因重排的交叉 T,B之间:不成熟的T或B相对频繁 TCRab, TCRrd之间 前T细胞性白血病/细胞淋巴瘤 几乎所有都存在TCR克隆性重排,但大约20%同时伴有IGH基因重排 前B细胞性白血病/淋巴瘤,非特殊类型 均有IGH DJ 区克隆性重排 >70% 存在TCR, 重排对谱系鉴定无帮助 毛细胞白血病 共同表达多克隆性IG亚型,认为存在多点亚型转换阻滞 T细胞大颗粒淋巴细胞白血病 TCRγ,TCRβ克隆性重排,存在TCRγδ,TCRαβ交叉 NK细胞慢性淋巴细胞增生异常 没有IG和TCR克隆性重排 侵袭性NK细胞白血病 没有IG和TCR克隆性重排 结外NK/T 细胞淋巴瘤,鼻型 大多IG及TCR无重排,少数因存在反应性细胞毒性T细胞导致TCR克
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