植物培养总结.docVIP

全能性 原理：生物体的每一个细胞都包含有该物种所特有的全套遗传物质，都有发育成为完整个体所必需的全部基因，从理论上讲，生物体的每一个活细胞都应该具有全能性。 差异：（1受精卵的全能性最高；（2受精卵分化后的细胞中，体细胞的全能性比生殖细胞的低。 培养条件：基本培养基和适宜的植物生长调节物质，适宜的温度、空气、无菌环境、适合的pH、适时光照等。 愈伤组织培养--最为常见的组织培养。将外植体接种在人工培养基上，由于植物生长调节剂的存在，而其细胞脱分化形成愈伤组织，然后通过再分化形成再生植株。 器官培养--将植物的器官如胚、胚乳、珠心、子房、根、茎、叶、花和幼果的部分组织接种在无菌培养基上进行培养。 茎尖组织培养- 细胞培养--悬浮细胞培养、单细胞培养 原生质体培养--胚、胚乳、珠心、子房、根、茎、叶、花和幼果的部分组织的培养 细胞培养是将植物的单个细胞分离出来，并进行培养，而原生质体培养是指将植物细胞的细胞壁通过机械、化学的方法去除，然后再进行培养。 原球茎----主要是兰科植物在诱导时，分化出的原初植物形态，具有完整植株的器官雏形，成苗容易。?? 胚状体-----由愈伤组织或表面形成的许多类似胚的突起，是初步分化的幼小生命体，芽根有共同的维管束，是双极性结构，起源于单细胞，无嵌合现象，结构完整，可直接形成小植株，成苗率高，去分化难，再分化也很难。 胚状体与不定芽的区别 胚状体在组织学上具备以下和不定芽不同的三个特征： ①最根本的特征是具有两极性。 ②胚状体的维管组织与外植体的维管组织 无解剖结构上的联系，而不定芽或不定根往往总是与愈伤组织的维管组织相联系。 ③胚状体的维管组织的分布是独立的“v”字形，而不定芽的维管组织无此现象 按培养方法分为：固体培养、液体培养、看护培养、微室培养 按培养过程分为：初代培养、继代培养 第一节 植物组织培养设备 1.灭菌设备：高压蒸气灭菌锅 用于培养基、蒸馏水和接种器械的灭菌消毒。 工作原理：在密闭的蒸锅内，0．1MPa的压力下，锅内温度达121℃。在此蒸气温度下，可以很快杀死各种细菌及其高度耐热的芽孢。 使用方法：首先检查灭菌锅内是否有水，而且水刚好淹住加热器，然后放入灭菌材料，对称拧紧灭菌锅上的螺丝。打开放气阀，放出冷空气，再关闭放气阀。压力表上升达0．1 ~ 0．15Mpa时，维持20~30min后，断电，待压力降至零时，打开入气阀，取出灭菌材料。 注意事项：①对高压灭菌后不变质的物品，如无菌水、栽培介质、接种用具，可以延长灭菌时间或提高压力。而培养基要严格遵守保压时间，既要保压彻底，又要防止培养基中的成分变质或效力降低，不能随意延长时间；②高压灭菌前后的培养基，其pH值下降0.2-0.3单位。因此，调pH值时，可适当调高0.2－0.3个单位。 2.接种设备：无菌超净工作台：用于培养材料的消毒及接种。 使用前，用75％的酒精擦拭超净工作台面，将排风和杀菌按钮开启，灭菌20-30min后，关闭杀菌按钮，打开照明按钮，即可在上面进行操作。 3.培养设备 ①带日光灯的培养架，主要用于接种后材料的培养。 ②恒温箱：又称培养箱，可用于原生质体和酶制剂的保温，也可用于组织培养材料的保存及暗培养。 ③摇床与转床：在液体培养基中，可改善培养基中的培养材料的通气状况。如从疏松的愈伤组织中获得单个细胞。但注意要设定适合的温度及转速。 4.驯化设备 ①温室 ②防虫网室 5、其它辅助设备 ①培养基灌装机及洗瓶机②空调机③ 除湿机④烘箱⑤冰箱⑥纯水机与蒸馏水发生器⑦天平和显微镜⑧酸度计 第二节 培养基及其配制 4.有机附加物：其对细胞和组织的增殖与分化有明显的促进作用，但对器官的分化作用不明显。其成分大多不清楚，所以一般应尽量避免使用。 常用的有机附加物有:⑴椰乳：⑵香蕉：⑶水解酪蛋白： 5.植物生长调节物 植物激素是植物新陈代谢中产生的天然化合物，它能以极微小的量影响到植物的细胞分化、分裂、发育，影响到植物的形态建成、开花、结实、成熟、脱落、衰老和休眠以及萌发等许许多多的生理生化活动，在培养基的各成分中，植物生长调节物是培养基的关键物质，对植物组织培养起着决定性作用。 5.1生长素类(auxin)： 在组织培养中，生长素主要被用于诱导愈伤组织形成，诱导根的分化和促进细胞分裂、伸长生长。在促进生长方面，根对生长素最敏感，在极低的浓度下，就可促进根生长，其次是茎和芽。天然的生长素热稳定性差，高温高压或受光条件易被破坏。在植物体内也易受到体内酶的分解。一般生长素浓度的使用为0.05－5mg／L。 ⑴ IAA(吲哚乙酸)是天然存在的生长素，亦可人工合成，其活力较低，是生长素中活力最弱的激素，对器官形成的副作用小、，高温高压易被破坏，也易被细胞中的IAA分解酶降解，受光也易分解。 ⑵ NAA(萘乙