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lcq_液质联用仪基本操作讲座

On/Standby切换 LCQ 液质联用仪基本操作讲座 李蓓佳 LCQ 液质联用仪基本操作讲座 LCQ液质联用仪简介 LCQ液质联用仪基本操作 Xcalibur Tune Plus LCQ液质联用仪日常维护 注意事项 On/Standby切换 LCQ液质联用仪简介 LCQ组成 API (atmospheric pressure ionization)源,软电离源。 ESI (Electrospray ionization)源,中等及强极性化合物 APCI (Atmospheric pressure chemical ionization)源,低极性化合物 Iontrap 质量分析器 多级质谱 定性 检测器 真空系统 LCQ液质联用仪基本操作 Xcalibur 是LC-MS从方法开发到报告显示进行控制的操作平台。 基本操作。 Tune Plus 是直接控制质谱的界面,通过该界面可以直接完成质谱仪的校正,目标离子优化,质谱参数设定,碰撞能量优化,更换离子源的设定,改变质谱方法或直接进样分析样品等。 Xcalibur 仪器方法设置 Instrument setup 进样列表设置 Sequence setup 定性浏览器 Qual browser 定量浏览器 Quan browser 谱库检索数据浏览器 Library browser 数据处理方法设置 Processing setup Rodemap-Home Page 查看Roadmap界面 查看序列设定界面 查看实时数据采集界面 打开仪器状态信息栏 打开仪器方法设置界面 打开定性,定量及报告格式设置方法界面 开始,停止,暂停/继续分析工具 Xcalibur- Instrument setup 此界面包括 设置 依次为自动进样器, DAD检测器, 柱温箱,四元泵和质谱. 点击任何一个图标界面右侧出现于该部件对应的仪器设置. 直接操控各部件 注意:首先要选中你欲操控的部件。 Agilent 1100 direct control LCQ advantage direct control Xcalibur- Instrument setup 注意:将Timed Events 设置如图,给质谱一个开始采集数据的命令 Xcalibur- Instrument setup Xcalibur- Instrument setup General MS or MSn 适用于获得未知化合物的结构信息。对于已知化合物的定量有一定适用性。 Data dependent 数据依赖 质谱检测器可根据data dependent 的信息来自动决定下一步实验而不用人为输入。 Data dependent MS/MS,Data dependent Triple play是在其基础上常用方法模版. General MS or MSn 根据样品分离出的不同组分分别采取不同的检测方式 采集时间延迟,使UV和MS一致,管路长短而异 本仪器质谱扫描最大范围m/z 2000 降低离子动能,减少溶剂峰,二倍峰等 Turboscan 快速扫描,降低分辨率 Wideband activation 同时对[M+H]+和[M+H-18]+碰撞,防止水合峰给出假信号 Data dependent Data dependent Data dependent Exclusion duration 注意:时间不宜设太长,峰R.T.30.28和峰R.T.30.57全扫描模式以相同的m/z 为基峰,如排除时间设为1min,则峰R.T.30.57信息获得不全。 作用:获得更多的结够信息 Data dependent General MS or MSn 生物样品较脏前三分钟不能进源 Xcalibur- Instrument setup Data dependent ion tree 可以获得一系列的MSn数据 Depth Focus 先对最强离子做一系列的MSn级的裂解,然后再对次强离子做MSn裂解。 Breadth Focus 同一MSn水平的离子全部碰撞后,再做下一级的离子的碰撞。 Xcalibur- Instrument setup Data dependent Zoom scan 将样品中的离子按质荷比从低到高依次别做别Zoom scan Ion mapping 将样品中自离子由低到高分别做二级质谱 适用于复杂样品中获得所有不同分子量的结构信息。 Xcalibur- Sequence setup LCQ液质联用仪日常维护 注意事项 On/Standby切换 注意事项 试剂 缓冲液 (挥发性) 磷酸盐和硼酸盐绝对不允许 甲酸,乙酸,醋酸铵,TEA等均可 溶剂 (超色谱级) 专

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