南理工微生物学课件 第四章.pptVIP

* 噬菌体裂解循环-6 * 三.温和噬菌体与溶源性 温和噬菌体Temperate phage：侵入细菌细胞后不产生子代噬菌体也不裂解细胞的噬菌体； 溶源性Lysogeny：温和噬菌体侵染细菌后与细菌共存的特性。 1.温和噬菌体 在溶源性细菌中，温和噬菌体DNA与宿主染色体DNA发生整合，处于前噬菌体prophage状态，二种DNA基本同步复制(病毒垂直传递方式)。 温和噬菌体：coliphageλ、Mu-1、P1、 P2；鼠伤寒沙门氏菌噬菌体P22等 * 2.溶源性细菌及其检出 1)溶源性细菌：具有遗传的、产生前噬菌体的能力自发裂解，或经诱导裂解；对同源噬菌体具有免疫性；经诱导裂解能存活下来可以“复愈”获得新的特性(如白喉棒状杆菌的白喉毒素的产生)—溶源转变；可发生局限性转导—将宿主的个别基因转移到另一细菌细胞 自然界的细菌多数是溶源性细菌。 温和噬菌体与溶源性细菌的关系对动物病毒作用动物细胞的指征意义。 2)溶源性细菌的检出：紫外照射待检菌株—在敏感细菌平板上检测噬菌斑。 * λ 噬菌体的溶源和裂解 * λ 噬菌体的溶源过程-1 * λ 噬菌体的溶源过程-2 * λ 噬菌体的溶源过程-3 * * 第三节 病毒的定性与定量检测 一.直接法：用电子显微镜直接观察并进行计数。 二.间接法：主要是检测病毒感染后的病变效应—噬菌斑、空斑、痘斑、坏死斑、CPE等 1.噬菌斑：在均匀涂布敏感细菌的平板上不长细菌的透明区域，理论上一个噬菌斑是一个噬菌体侵染的结果；噬菌斑的形态学特征具有鉴定意义。 2.空斑和感染病灶：动物病毒在单层细胞上可形成空斑，肿瘤病毒则形成感染病灶。 3.坏死斑：植物病毒感染对应宿主植物后可形成明显的花斑、环斑、条斑、变色斑等? * 噬菌体在大肠杆菌平板上形成的噬菌斑 * 动物病毒空斑 * 脊髓灰质炎病毒在Hela细胞上形成的空斑 * 巨细胞病毒感染细胞的CPE： A：健康细胞；B：感染细胞；C：细胞退化；D：空斑 * 植物病毒感染后的变色斑 * * 4.病毒定量研究中的几个概念 1)病毒效价(滴度)titre：单位体积的感染单位IU或噬斑形成单位PFU； 2)成斑率EOP(病毒感染效率)：IU或PFU总低于电镜计数值的现象，即病毒粒子对宿主细胞的感染率小于100%，噬菌体的EOP为50%左右，动物病毒的EOP维持在10%。因此，以IU或PFU所表示的病毒效价不能代表实际的病毒粒子数目，仅仅是成斑单位的数目。 * 5.包涵体inclusion body：动植物病毒感染细胞后在光学显微镜下可见的形态学小体。 多数包涵体在细胞质内，嗜酸性，如痘病毒和狂犬病毒包涵体；少数包涵体在细胞核中，嗜碱性，如疱疹病毒和腺病毒包涵体；个别包涵体既位于细胞核也可在细胞质，如麻疹病毒包涵体。 包涵体可以是病毒粒子聚集体(杆状病毒)，也可以是病毒蛋白或感染相关蛋白聚集体(巨细胞病毒致密体和植物病毒包涵体)。 包涵体用于病毒快速鉴别和诊断的意义。 6.细胞病变效应cytopathic effect CPE 病毒感染后发生在细胞水平的退行性病变和异常 鸡胚接种的病变观察；体外培养细胞接种病毒的显微病变。 * 第四节 病毒分类 病毒感染的范围几乎包括所有的细胞生物。 根据核酸类型：DNA病毒和RNA病毒； 根据感染宿主：动物病毒、植物病毒、细菌 病毒、真菌病毒、藻类病毒； 一.病毒分类依据：核酸类型、结构；有无包膜；衣壳结构；培养特征和流行病学特征等。 二.细菌病毒(噬菌体) 多数是DNA 病毒，少数为RNA病毒 三.真菌病毒 包括丝状真菌病毒和酵母菌病毒 四.藻类病毒—噬藻体 * 五.植物病毒 绝大多数为RNA病毒，少数是DNA病毒。 主要类群：花椰菜花叶病毒组；番茄斑萎病毒组；烟草坏死病毒组；番茄丛矮病毒组；芜箐黄花叶病毒组；马铃薯X病毒组；马铃薯Y病毒组；烟草花叶病毒组；豇豆花叶病毒科；大麦病毒组；烟草脆裂病毒组；雀麦花叶病毒科；豌豆花叶病毒组；黄瓜花叶病毒组；香石竹病毒组。 * 六.脊椎动物病毒(鱼病毒；禽病毒；哺乳动物病毒；医学病毒)。 DNA病毒和RNA病毒各占一半。 主要类群：痘病毒科；疱疹病毒科；腺病毒科；虹彩病毒科；嗜肝DNA病毒科；乳多空病毒科呼肠孤病毒科；冠状病毒科；副粘病毒科；正粘病毒科；弹状病毒科；披膜病毒科；黄病毒科；杯状病毒科；砂粒病毒科；小RNA病毒科；布尼亚病毒科；逆转录病毒科 七. 无脊椎动物病毒 主要类群：昆虫杆状病毒；昆虫痘病毒；昆虫虹彩病毒昆虫呼肠孤病毒；昆虫细小病毒；昆虫弹状 病毒；双RNA病毒科；螨类病毒；甲壳