《动物遗传学》实验教学大纲.doc

《动物遗传学》实验教学大纲 适用专业：动物科学 一、学时分配 序号 实验项目 实验类型 是否书写实验报告 学时 1 实验一、细胞有丝分裂显微观察 验证性 是 2 2 实验二、果蝇的形态、生活周期及其饲养 验证性 是 2 3 实验三、鸡的伴性性状观察与分析 验证性 是 2 4 实验四、基因的连锁、交换与定位 综合性 是 2 5 实验五、人类外周血淋巴细胞染色体标本的制备 综合性 是 4 6 实验六、质粒DNA的小量快速提取 验证性 是 2 7 实验七、外周血白细胞DNA的提取 验证性 是 4 8 实验八、目的基因的多聚酶链反应（PCR） 验证性 是 2 9 实验九、琼脂糖凝胶电泳检测DNA 验证性 是 2 10 实验十、DNA的聚丙烯酰胺凝胶电泳 验证性 是 2 11 实验十一、目的基因的PCR-RFLP检测 设计性 是 4 12 实验十二、目的基因的T-A克隆与筛选 演示性 否 0 开放性 是 20 13 实验十三、Southern/Northern blot，Western blot等录像 验证性 否 2 合 计 30 注：根据每年的实际情况，教研室选择24学时实验项目，其余为选做实验项目，在实验室开放过程中完成。 二、实验指导用书 动物遗传育种与繁殖教研室自编 三、实验内容 实验一：细胞有丝分裂显微观察 【目的与要求】 1.熟悉普通光学显微镜的主要构造及其性能 2.掌握细胞有丝分裂各时期观察 【内容提要】 1．观察马蛔虫子宫切片； 2．观察洋葱根尖切片 。 实验二：果蝇的形态、生活周期及其饲养 【目的与要求】 让学生了解果蝇生活史及各个阶段的形态特征,，雌雄性别特征，常见突变型的特征，掌握实验果蝇的饲养,以及实验的处理方法和技术,为果蝇的杂交实验做基础。 【内容提要】 1辨别果蝇的雌雄性别 2果蝇的饲养技术 3果蝇的形态、生活史及各阶段的形态特征观察 实验三：鸡的伴性性状观察与分析 【目的与要求】 过实习使学生掌握伴性遗传原理及在生产中。 过实习使学生掌握鸡的伴性性状的识别方法。 通过实习使学生掌握雌雄鸡雏的鉴定方法。 【内容提要】 1．观察鸡的伴性性状 2．分析伴性性状的遗传现象 实验四：基因的连锁、交换与定位 【目的与要求】 1．正确理解基因连锁与交换的机理。 2．加深理解连锁遗传规律。 3．掌握基因定位的三点测验方法。 【内容提要】 1观察果蝇的连锁性状 2 果蝇的饲养方法 3 基因作图 实验五：人类外周血淋巴细胞染色体标本的制备 【目的与要求】 1、了解人体外周血淋巴细胞短期培养的基本方法。 2、初步掌握人体外周血淋巴细胞染色体标本制备的技术方法 【内容提要】 人体外周血中的小淋巴细胞，是已分化、处于G0期的细胞，几乎不具有分裂增殖能力。在体外培养条件下，若于培养基中加入植物凝集素(PHA)则可刺激处于G0期的淋巴细胞转化为淋巴母细胞，重新获得有丝分裂的能力，经一段时间的培养即可获得大量分裂期细胞以供染色体分析。 秋水仙素(或秋水酰胺)可通过干扰微管组装而抑制纺锤丝形成，使细胞分裂不能顺利进入后期而停滞于中期，从而可在短期内积累大量最适于进行染色体分析的中期分裂相。这些中期分裂相经过低渗和固定后分散于载玻片上，供染色体分析。 实验六：质粒DNA的小量快速提取 【目的与要求】 1．了解质粒作为载体在基因工程中的应用。 2．熟记提取质粒的基本原理，学习提取过程和方法。 plasmid）是一种染色体外的稳定遗传因子，大小在1-200kb之间，具有双链闭合环状结构的DNA分子，主要发现于细菌、放线菌和真菌细胞中。质粒具有自主复制和转录能力，能使子代细胞保持它们恒定的拷贝数，可表达它携带的遗传信息；可以独立游离在细胞质内，也可整合到细菌染色体中。因此，提取质粒成为基因工程操作中非常重要的实验过程。所有分离质粒DNA的方法都包括3个基本步骤：培养细菌使质粒扩增；收集和裂解细菌；分离和纯化质粒DNA。 实验七：外周血细胞DNA的提取 【目的与要求】 1、了解DNA提取的原理； 2、学会实验室常用的提取基因组DNA的方法。 【内容提要】 从不同组织细胞或血细胞中提取高质量的DNA是进行动物分子遗传学各项研究的先决条件。制备高质量DNA的原则是：尽可能保持DNA分子的完整；将蛋白质、脂类、糖类等物质分离干净。哺乳动物DNA的提取通常是在有EDTA-Na2及SDS一类的去污剂存在下，用蛋白酶K消化细胞，然后用酚、氯仿抽提实现的。在Tris-HCl饱和酚（pH 8.0）作用下，DNA被释放到上清液中，经过氯仿去蛋白、去酚（因为可有10%的酚溶于水）作用后，乙醇可使DNA分子聚合形成白色或无色絮状沉淀，从而获得粗提DNA。用这一方法获得的基因组DNA大小约