恶性黑色素瘤急性炎症复合动物模型的建立.docVIP

恶性黑色素瘤急性炎症复合动物模型的建立 作者：刘祎，陈爱霞，邢敬龙，张丹芳，韩健，马跃美 【摘要】 目的 建立不同类型的恶性黑色素瘤-急性炎症复合模型，筛选出最佳方案。方法 将25只条件相同的小鼠随机分为创伤肿瘤组（A），持续扩创肿瘤组（B），创伤化脓菌肿瘤组（C），创伤冰乙酸肿瘤组（D），单纯肿瘤组（E），每组5只，先建立肿瘤模型，待肿瘤长到500 mm3建立急性炎症模型，观察炎症状况与肿瘤生长情况。结果 A组与E组小鼠肿瘤生长接近，B，C，D组肿瘤生长接近且慢于E组。结论 急性炎症期的持续是成功建立模型的重要前提。 【关键词】 恶性黑色素瘤；动物模型；急性炎症 Abstract: Objective Studying various types of malignant melanomaacute inflammation model in mouse to find the best manner. Methods 25 mice were divided into five groups by random.（Group A,B,C,D were experimental groups；Group E was control group）.The mouse melanoma model was made with B16 cell suspending liquid. When the tumor’s volume was about 500 mm3, four kinds of acute inflammation models were built. The condition of wound and the growth of tumor were recorded. Results The growth of tumor in group A was similar to the control；The growth of tumor in group B, C, D were almost the same and slower than the control group. Conclusion A sustained acute inflammation process was necessary to this model. Keywords: malignant melanoma; animal model；acute inflammation 炎症与肿瘤有着非常密切的联系。恶性黑色素瘤具有很强的侵袭与转移能力［1］，是研究恶性肿瘤的良好模型。本实验通过建立四种恶性黑色素瘤-急性炎症复合动物模型，阐明各自优劣，为研究恶性肿瘤与炎症的关系提供可借鉴的动物模型。 1 材料与方法 1.1 实验动物 C57小鼠购于北京军事医学 科学 院动物中心，8周龄，雄性25只，体重25～30 g，编号后随机分为创伤肿瘤组（A），持续扩创肿瘤组（B），创伤化脓菌肿瘤组（C），创伤冰乙酸肿瘤组（D），单纯肿瘤组（E），每组5只，交由天津医科大学动物中心洁净饲养。 1.2 实验方法 1.2.1 荷瘤鼠模型 将黑色素瘤细胞株B16复苏，1 640培养基培养1周，0.2%胰酶消化成单细胞悬液，调整细胞密度达到1×107/mL。75%酒精消毒小鼠右鼠蹊部，每只皮下注射0.2 mL细胞悬液。每天观察小鼠生命体征及肿瘤细胞生长情况。10 d后接种部位开始出现皮下肿块，每天测量肿块长径（a）与短径（b），待肿瘤体积（v）达到500 mm3（v=a×b2/2）［2］,建立急性炎症模型。 1.2.2 急性炎症模型 乙醚麻醉小鼠后，右侧背部备皮，做直径约1 cm圆形创口。C组小鼠创口涂抹一层金黄色葡萄球菌悬液（ATCC25923）；D组小鼠涂抹一层冰乙酸（天津市瑞金特化学品有限公司）；B组小鼠每日3PM乙醚麻醉后扩创，使创口直径维持在1 cm左右。 1.3 检测方法 每日记录肿瘤生长情况与伤口情况，绘制肿瘤生长曲线。 1.4 统计学处理 应用SPSS13.0软件进行数据处理，P＜0.05具有统计学意义。 2 结果 2. 1 创口情况 A组：伤口明显收缩，表面干燥。B组：伤口边缘组织较陈旧，中央为新鲜肉芽组织。C组：伤口表面有脓茄。D组：伤口与组织粘连明显。 2.2 肿瘤体积 4个实验组与对照组肿瘤体积随时间推移而出现差异。A组与E组肿瘤生长曲线上升较快且趋于一致，B、C、D三组肿瘤生长曲线上升趋势则慢于A、E两组（图1），急性炎症对肿瘤的生长可能存在抑制作用，不同干扰措施对肿瘤生长的影响可能不同。采用单因素多变量方差分析处理肿瘤体积数据，“时间”及“分组”两项对应P值小于0.05，