生物素标记cDNA探针杂交检测梨树上3种潜隐病毒研究.pdfVIP

植物病理学报 ( ) ( ) A C TA PH YTO PA THOLO G ICA S IN ICA 　36 6 : 4 88493 2006 生物素标记 cDN A 探针杂交检测梨树上 3 种潜隐病毒研究 1 1, 2 1 1, 3 王利平 , 王国平 , 谭荣荣 , 洪 霓 ( 1华中农业大学植物科学技术学院, 武汉 430070; 2华中农业大学 国家果树脱毒种质资源室内保存中心, 武汉 430070; 3华中农业大学 湖北省作物病害监测与安全控制重点实验室 , 武汉 430070) ( ) ( ) ( ) 摘要 : 本研究合成了苹果茎沟病毒 A SGV 、苹果褪绿叶斑病毒 A CL SV 和苹果茎痘病毒 A SPV 的生物素标记 cDN A 探针 ,对斑点杂交和免疫印迹杂交检测这 3种病毒的效果进行了分析 。以含 A CL SV 和 A SGV 克隆片段的大肠杆菌菌液为 μ μ 样品时,斑点杂交检测灵敏度分别为 80 cfu / L 和 50 cfu / L 。以离体培养砂梨植株为材料 ,采用斑点杂交法检测砂梨离体 培养植株粗提液中的 3种病毒 ,均产生强的杂交信号 ,且特异性好 。比较斑点杂交和 EL ISA 检测病毒含量相对较低的热处 理再生植株 中 A SGV 和 A CL SV , 结果表 明斑点杂交具有较高的灵敏度 。组织印迹杂交检测砂梨离体植株 A SGV 和 A CL SV 的结果显示 ,这 2 种病毒在离体植株的各部位均有分布 , 自基部至茎尖各部位印迹均产生很强的杂交信号 。 关键词 : 斑点杂交; 梨; 潜隐病毒; 检测; 组织印迹 D e te c t io n o f th re e la te n t v iru s e s in p e a r b y h y b r id iza t io n w ith b io t in y la te d cDN A 1 1, 2 1, 3 1 p ro b e s 　 W AN G L ip ing , W AN G G uo p ing , TAN R ong rong, HON G N i 　( C o llege of P lan t 2 S c ience and Techno logy, H uazhong A gricu ltu ra l U n ivers ity, W uhan 430070, C h ina; N a tiona l Indoor C on serva tion C en ter of