2第三章 红细胞血型检测.ppt

适用范围 多用于抗球蛋白试验、ABO血型正/反定型、交叉配血及其他血型系统抗原检测。 中性胶 不含抗体，相当于试管的作用 特异性胶 含特异性抗体，如抗-A、抗-B，可进行AB抗原检测 抗球蛋白胶 含抗球蛋白，可进行IgG类抗体的检测 优点 操作简便、结果准确、灵敏度高、便于保存、节约标本、标准化、使用安全 第七节 吸收放散试验技术 重点提示 吸收试验 放散试验 临床应用 吸收试验 根据被检标本中所含抗体的最适反应温度，对其进行吸收。 冷抗体4℃反应最强，通常用冷吸收技术，即自身抗体用自身红细胞吸收，同种抗体用对应红细胞吸收，多为IgM抗体 温抗体 采用酶处理后的红细胞在37℃孵育，多为IgG抗体 吸收试验 原理：待检血清抗体加入已知抗原的红细胞，或待检抗原红细胞加入已知效价的特异性抗血清，产生抗原抗体反应，离心后分离经过抗原吸收的血清。将吸收前与吸收后的血清用生理盐水作倍比稀释并测定其效价差异，若吸收后的血清效价低于吸收前，证明待检血清中含有与已知红细胞抗原对应的抗体，或待检红细胞与加入的已知抗原的红细胞血型相同。 放散试验 通过改变物理条件把结合到红细胞膜上的抗体解离下来 获得红细胞上致敏的抗体（自身抗体）用于自身吸收 获得没有抗体吸附的红细胞，用于血型鉴定和交叉配血 放散试验 试验方法：热放散技术、乙醚放散技术、磷酸氯喹放散技术、冻融放散技术、柠檬酸放散技术、氯仿/三氯乙烯放散技术、二甲苯放散技术 临床应用 鉴定存在于红细胞上的弱抗原，分离、鉴定混合抗体、鉴定新生儿溶血病和免疫性输血反应的抗体等 IgM抗体检测时应使用冷吸收、热放散 IgG抗体检测时应在37℃吸收、乙醚放散 第八节 凝集抑制试验 重点提示 凝集抑制试验概念 唾液中可溶性ABH血型物质的检测 P1、I等血型抗原凝集抑制试验 凝集抑制试验简介 可溶性血型物质：人类血型抗原部分以游离形式存在于血浆、唾液等液体中，如ABH、Lewis、I、P、Chido、Rodger等 凝集抑制试验：用于鉴定存在于体液和(或)非红细胞上的可溶性血型物质，利用这些血型物质可以结合相应抗体这一性质，用红细胞检测抗体是否被吸收或中和的情况，以显示相应血型物质的存在。 唾液中可溶性ABH血型物质的检测 原理：人体液中可检出ABH抗原物质，称为分泌型；不存在ABH抗原物质，称为非分泌型。H物质在A、B、O、AB四型分泌型个体唾液中均存在， O型人含量最多 适用范围：用于ABO、MN等血型鉴定的辅助试验 实验方法：抑制物处理，抗体标化 P1、I等血型抗原凝集抑制试验 原理：当需要确定某些被检血清的抗体特异性时，可用已知血型物质辅助鉴定。如怀疑血清中含有抗-P1时，可用商品化的P1血型物质来确认 适用范围：用已知血型物质测定未知抗体的特异性 第九节 红细胞血型分子生物学检测 重点提示 分子生物学检测技术介绍 红细胞血型检测中的应用 分子生物学检测技术介绍 基本方法：利用DNA序列的特异性来间接区分等位基因 包括：引物延伸法（PCR-SSP）、限制性片段长度多态分析法（RFLP）、PCR-序列特异性寡核苷酸探针（PCR-SSOP）、PCR-单链构象多态（PCR-SSCP）、PCR反向点杂交（PCR-RDB）、PCR-DNA测序、基因芯片及PCR指纹图 红细胞血型检测中的应用 ABO疑难血型的鉴定 发现ABO血型新等位基因 ABO基因突变的研究 新生儿溶血病（HDFN）的辅助诊断 某些疾病的病理研究 法医个体识别 本章小结 输血前检查的目的是准确选择用于受血者的血液或血液制剂，使输注的血液成分能在受血者体内存活并发挥其有效作用。 输血前检查包括：ABO血型和RhD血型鉴定；不规则抗体筛查和鉴定；交叉配血试验等。 应用于输血前检查的试验技术有盐水介质、酶介质、凝聚胺介质试验技术和抗球蛋白试验、微柱凝胶试验、吸收放散试验、凝集抑制试验以及分子生物学检测技术，这些试验技术的应用大幅提升了临床输血安全。 Thank you ! 第二章 红细胞血型检测 穆士杰 目 录 第一节 输血前免疫血液学检查 第二节 盐水介质试验技术 第三节 酶介质试验技术 第四节 凝聚胺介质试验技术 第五节 抗球蛋白试验技术 第六节微柱凝胶介质试验技术 目 录 第七节 吸收放散试验技术 第八节 凝集抑制试验技术 第九节 红细胞血型分子生物学检测 第一节 输血前免疫血液学检查 重点提示 ABO血型和RhD血型鉴定 不规则抗体的筛查和鉴定 交叉配血试验 ABO血型和RhD血型鉴定 原理：利用抗原与抗体之间特异性结合的凝集反应来完成。 ABO血型鉴定：正定型、反定型。 正定型，检测红细胞表面是否存在A抗原和(或)B抗原；反定型，检测血清中是否存在抗-A／抗-B抗体（凝集素）。