2013-生化实验1.pptVIP

生物化学实验 生物化学实验要求 通过实验课，掌握比色、层析、电泳等基本实验方法的原理和操作技能，学会选择正确的方法进行生物材料中多种物质的分离、提纯及鉴定 通过实验加深对生物化学基本原理的理解 实验内容 一.实验基本操作训练 * * 广州大学 生命科学学院 胡位荣QQ406085067 什么是实验室？ 你打算如何在本实验室度过本学期？ 怎么样才算做好了一个实验？ 你想在本实验室学/做什么？ 观察 设问 提出 假说 检验 假说 修改 假说 导出新的科学理论或者定律 与当今理论或定律相符 交流 预习（报告/试讲） 独立/协作实施（记录） 独立分析/讨论 独立完成实验报告 回顾/总结 鼓励：尽可能在实验室和实验条件许可的范围内，可对实验内容进行改进、探究！ 材料 方法 设计 … 32学时/1学分 1小组/2人 1 胡位荣/柯德森/孙莉丽 实验课考核 第17周一5-7节 1 胡位荣/柯德森/孙莉丽 验证 3 维生素C的定量测定 10 第15-16周一5-7节 1 胡位荣/柯德森/孙莉丽 综合 6 氨基转移反应—血清转氨酶活力测定 9 第14周一5-7节 2 胡位荣/柯德森/孙莉丽 验证 3 底物浓度对酶促反应速度的影响—米氏常数的测定 8 第13周一5-7节 2 胡位荣/柯德森/孙莉丽 验证 3 发酵过程无机磷的利用 7 第12周一5-7节 2 胡位荣/柯德森/孙莉丽 综合 3 蛋白质的聚丙烯酰胺凝胶电泳 6 第11周一5-7节 1 胡位荣/柯德森/孙莉丽 验证 3 酶的特性 5 第10周一5-7节 1 胡位荣/柯德森/孙莉丽 验证 3 蛋白质的性质实验 4 第9周一5-7节 1 胡位荣/柯德森/孙莉丽 验证 3 氨基酸的分离鉴定—纸层析法 3 第8周一5-7节 2 胡位荣/柯德森/孙莉丽 验证 3 Bradford法测定蛋白质的含量 2 第7周一5-6节 1 胡位荣/柯德森/孙莉丽 验证 2 实验基本操作训练及标准曲线的制备 1 实验时间 每组人数 实验教师 实验类型 实验学时 实验项目名称 序号 EXP.1 实验基本操作训练及标准曲线的制备 实验的准确性 单位量 准确测量 个人误差 仪器局限 标准物空白实验 偶然误差：重复/平均值 误差来源 实验报告 实验方法/步骤不得照抄实验指导书 P219—228 实验室规则 基本操作 实验室规则 玻璃器皿的清洗 常用仪器的使用方法 领用/清洗/归还 目的 内容 P229—232 测量值与真实值之间的差异即误差 ●滴定管 吹or不吹？ ●吸管 碱式/酸式？ 小数点后2 or 3位？ ●量筒 何时该用量筒/移液管/gun？ ●移液枪 量程的调节 if要从大→小，则按正常调节方法即逆时针旋转旋钮 但if要从小→大时，则可先顺时针旋转刻度旋钮至超过量程的刻度，再回调至设定体积，这样可保证量取的最高精确度。 　　在该过程中，千万不要将按钮旋出量程，否则会卡住内部机械装置而损坏 枪头（吸液嘴）的装配 使劲地在枪头盒子上敲几下 × 将移液枪（器）垂直插入枪头中，稍微用力左右微微转动即可使其紧密结合 枪头卡紧的标志是略为超过O型环，并可以看到连接部分形成清晰的密封圈 移液的方法 处于相同温度 移液器保持竖直状态，将枪头插入液面下2-3mm 在吸液之前，可先吸放几次液体以润湿吸液嘴 用大拇指将按钮按下至第一停点，然后慢慢松开按钮回原点。接着将按钮按至第一停点排出液体，稍停片刻继续按按钮至第二停点吹出残余液体。最后松开按钮 维护保养 校准在20-25℃环境中，通过重复几次秤量蒸馏水的方法来进行 使用时要检查是否有漏液。吸取液体后悬空垂直放置几s，看看液面是否下降 高温消毒之前，要确保移液器能适应高温 可用肥皂水或60％异丙醇定期清洗移液枪，蒸馏水清洗，自然晾干 如不使用，要把量程调至最大刻度，使弹簧处于松弛状态以保护弹簧 移液器的正确放置 使用完毕可将其竖直挂在移液枪架上，小心别掉下来。当枪头里有液体时，切勿水平放置或倒置，以免液体倒流腐蚀活塞弹簧