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两种辣木DNA提取方法比较.pdf
第42卷 福建热作科技 Vbl.42NO.1
第1期 of 2017
FujianScience&TechnologyTropicalCrops
两种辣木DNA提取方法比较
林艺华,杨俊杰,张天翔,曹明华,林宗铿木
(福建省热带作物科学研究所,漳,’1,1363001)
摘要:以辣木嫩叶为材料,分别通过改良CTAB和试剂盒法提取7个品系辣木的总DNA,结果表明,试剂盒
法提取的辣木DNA在琼脂糖凝胶电泳中条带清晰,DNA纯度高,完整性好,且操作简单,快速,满足分子标
记中模板的需要,解决』,辣木提取中蛋白杂质多的问题。因此,在辣木分子标记实验中,选择试剂盒法提取辣
木总DNA是较为适宜的。
关键词:辣木;改良CTAB;试剂盒:DNA
中图分类号:Q946 文献标识码:A
辣木(Moringa
独特的经济价值和营养保健作用。辣木各个部位均可食用或入药,因其含有较高的蛋白质、维生素和矿
物质而在多个发展中国家广泛种植[14]。辣木在全世界约有13个种,随着人们对辣木功效和营养价值的
认可,近年来,在我国云南、海南、四川、广东、贵州和福建等多地快速推广种植,但一些地方盲目种
植、品种名称混乱的现象时有发生。因此,应用分子标记手段对辣木品系进行种质资源鉴定迫在眉睫,
而高质量的DNA是辣木植物分子生物学研究的基础。本研究采用改良CTAB法和植物基因组提取试剂
盒分别提取7种辣木品系的总DNA,通过比较其优劣以得到满足辣木分子标记中PCR扩增对于模板
DNA的要求,为辣木亲缘关系及遗传多样性分析奠定基础。
l材料与方法
1.1材料与试剂
本研究所用辣木样品共7份,均取白于本研究室实验田。品系编号及名称 表1所用辣木品系名称
见表1,试验地点为漳州市天宝镇五峰省热作所。植物基因组DNA提取试剂盒编号 品系名称
l 原种M0
购自北京天根生化科技有限公司。液氮,CTAB(十六烷基三乙基溴化铵),Tris
2 云南自选种Yl
(三羟基氨基甲烷),EDTA(乙二胺四乙酸),B一巯基乙醇,氯仿,异戊醇,
异丙醇,无水乙醇,醋酸钠,氯化钠,盐酸,氢氧化钠,冰乙酸,硼酸,均为 3 非洲种
View 4 台湾
Nucleic
国药集团化学试剂有限公司分析纯产品,琼脂糖(Takara),Gold
5 PKMl
Acid DNA
stair(sbs),6×loadingBuffer(Takara),DL2,000Marker(Takara)均购自大
6 缅甸
连宝生物工程有限公司。
7 泰国
1.2试齐0配制
1M 1 mL双蒸水中,冷却至室温
Tris母液(pH值8.0):取Tris碱(分子量121.14)12.1g溶于80
后用浓HCl调节pH值至8.0,然后用超纯水定容,灭菌后使用。
0.5M
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