固相微萃取-气相色谱-质谱联用法分析樟芝发酵液、液体发酵菌丝体和固体培养菌丝体中香气成分.pdfVIP

食用菌学报◎2016．23(4)：48～52 DOI：10．16488／j．cnki．1005—9873．2016．04．010 固相微萃取一气相色谱一质谱联用法分析樟芝发酵液、 液体发酵菌丝体和固体培养茵丝体中香气成分 杨海芮1‘2，贾 薇1，张劲松1，张赫男1，杨焱1，樊华3，刘志东4， 张亚平2，汪雯翰H，孙文博5 (1上海市农业科学院食用菌研究所，农业部南方食用菌资源利用重点实验室，国家食用菌工程技术研究中心， 国家食用菌加工技术研发分中心，上海市农业遗传育种重点开放实验，上海201403；2石河子大学生命科学学院， 新疆石河子832000；3德国柏林大学和洪堡大学夏洛特医学院实验医学、临床医学和病理生物化学研究所，柏林13353； 4中国水产科学研究院东海水产研究所，上海200082；5山东省农业科学院畜牧兽医研究所，山东济南250100) 摘要：采用固相微萃取一气相色谱一质谱联用分析樟芝(Taiwanofunguscamphoratus)发酵液、液体发酵菌丝 体和固体培养菌丝体中挥发性成分，其中共鉴定出30种香气成分。发酵液中有14种香气成分，相对含量为 43．76％，以醇类为主；液体发酵菌丝体有19种香气成分，相对含量为34．97％，以醇类和醛类为主；固体培养 菌丝体中有15种香气成分，相对含量为12．21％，以醛类为主。 关键词：樟芝；固相微萃取；气质联用 樟芝(Taiwanofungus 芝、樟生薄孔菌、牛樟菇、红樟芝等[1]。由于樟芝自然产量十分稀少以及子实体人工栽培技术尚未标准 化及产业化，导致樟芝子实体的价格十分昂贵，而液体发酵由于周期短、成本低、产量大、原材料来源广 泛等优点，具有更好的生产前景。药用真菌中的一些香气成分具有抗菌、抗氧化、抗肿瘤等多种生理活 性[2。4]。野生樟芝具有牛樟树的清香，人工培养的樟芝茵丝体及发酵液也具有令人愉悦的芳香气味。 而目前对樟芝香气成分的研究较少，因此，笔者采用固相微萃取．气相色谱．质谱联用分析樟芝发酵液、 液体发酵和固体培养菌丝体中香气成分的种类及含量，为开发樟芝相关产品提供参考。 1材料与方法 1．1材料 1．2主要仪器 (美国安捷伦公司)。 1．3样品制备 樟芝发酵液和液体发酵菌丝体制备参考文献E53。固体培养菌丝体的制备：将樟芝接种于PDA 平板上(9cm)，26℃恒温倒置培养30d。菌丝体冷冻干燥后保存备用，发酵液于4℃保存备用。 1．4样品前处理 将萃取头在气相色谱的进样口于250℃老化至无杂峰，将装有样品的顶空瓶(20mL顶空瓶装入 1 mL发酵液或1 g菌丝体)放人70℃的恒温水浴锅中，将SPME萃取头通过瓶盖插入到样品的顶空部 分，推出纤维，经过15min的顶空吸附之后抽回萃取头，并将其从顶空瓶中拔出。将萃取头插入气相 色谱．质谱联用仪的气相色谱进样口，推出萃取头解析2min，用气相色谱．质谱联用仪测定。 收稿日期：2016—07—11原稿；2016—09—22修改稿 基金项目：上海市自然科学基金(16ZRl431000)和山东省博士基金(BS2013SW022)资助 作者简介：杨海芮(1991一)，女，在读硕士，主要从事天然产物抗肿瘤活性研究。 。本文通讯作者E-mail：wangwenhan@saas，sh．CII 万方数据 第4期杨海芮，等：固相微萃取．气相色谱．质谱联用法分析樟芝发酵液、液体发酵菌丝体和固体培养菌丝体中香气成分 49 1．5气相色谱一质谱条件 m×0．25 min，以 色谱条件：HP．INNOWAX(30mm×0．25弘m)色谱柱；进样温度：40℃保持5 min；载气：氦气(99．999％)；流量：1mL／min； 5℃／min升至240℃，以20℃／min升至260℃，保持5 ev； 接口温度：260℃；质谱