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- 2017-05-21 发布于河南
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第五章 固相析出分离法 * (三)薄层凝胶层析 用交联葡聚糖作为薄层层析的支撑载体,称“薄层凝胶层析”。 仅适用于分析 。 特点:? 生化分析; 设备简单,操作方便,分离迅速; 分辨率高; 同一薄板可同时分析数个样品; * 第四节 色谱峰变宽的问题 样品的洗脱曲线不是一个窄的矩形峰,而是一个较宽的高斯峰。 洗脱曲线: 样品的分子量分布, 仪器造成的峰加宽效应。 * 一、溶液通过色谱柱造成的峰加宽 Giddings提出的无规则行走模型。 溶质分子本身的运动是无规则的。 (一)分子扩散 (二)涡流扩散 (三)流动相中传质阻力 (三)固定相中传质阻力 * (一)分子扩散 浓度梯度 (HETP)d=2γDm/V (HETP)d—溶质分子纵向扩散对塔板高度的贡献 γ—扰动因子,表示柱内填料对于溶质分子扩散的扰动作用。 Dm—是溶质分子在流动相中的扩散系数;V—流速。 (1)小而均匀的填料 (2)适当的溶剂 (3) 提高流速 * (二)涡流扩散 与填料颗粒的形状,尤其是颗粒尺寸有关。 (HETP)e=2λdp dp—填料颗粒的直径; λ—是与填料及装填有关的常数。 (1)小而均匀的填
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