chap9.4糖的研究方法.pptVIP

第九章 糖链研究方法 §9.4 糖复合物生物功能研究方法 糖链的功能需要进行体内研究 许多缺乏糖基转移酶或糖苷酶的细胞系在体外并未表现出明显的表型，而在体内却能引发病理改变和在某些情况下导致胚胎死亡。 哪些方法可以用来造成糖复合物中糖链的改变进而观察其生物功能改变？ 糖链缺失/增加 糖链上的糖基改变 糖链末端糖基缺失/增加 糖复合物中糖链功能的研究方法 糖复合物生物功能研究方法（1） 1）利用糖基化过程不同的天然突变细胞株 可将细胞用化学（如烷化剂）、物理（如电离辐射）或生物（如病毒转染）方法进行处理，使细胞发生诱变。 可使用凝集素（细胞毒性或导致细胞黏附）抗性、辐射自杀、影印铺板等方法筛选突变体。 常缺失或过表达糖链合成加工中的某一或是某些糖基转移酶或糖苷水解酶。 但糖链加工的缺陷有时不完全或不专一。 可以在体外研究细胞粘附，分子识别和蛋白质折叠、分拣等。但对于糖链在胚胎发育和分化中的作用研究有局限性。 影印铺板法筛选突变体细胞 N-糖基化过程有关的细胞突变株 糖基供体（糖核苷酸）的合成和转运缺陷 糖基转移酶的动力学性质或细胞定位改变 新的糖基转移酶被活化 GPI锚生物合成的突变体 蛋白聚糖组装中的突变体 糖脂和粘蛋白组装中的突变体 … 糖核苷酸合成和转运中的细胞突变株 糖基