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第三届“天人杯”浙江省大学生生物与环境知识邀请赛题库 第三届“天人杯”浙江省大学生生物与环境知识邀请赛筹备组 2010年4月 生物技术部分 我们经常吃的桔子在结构上属于内果皮——准确点说是内果皮上的表皮毛 海带孢子 —— 先在叶上长出很多像口袋一样的孢子囊。囊里有许多孢子，等孢子囊一破裂，那些孢子就四处游散。孢子用前后两端的鞭毛，在海里到外游荡，一旦落在海底的岩石上，就慢慢的生长起来α-细胞约占15%~25%，分泌胰高血糖素，β-细胞约占70%~80%，分泌胰岛素。 延脑、脑桥、中脑、与间脑几部分合称为脑干。 人的脑细胞有12对，分为运动神经、感觉神经、混合神经。 人的感光细胞可分为视锥细胞和视杆细胞。 动物受精卵发育阶段：桑椹胚、囊胚、原肠胚、神经胚、中胚层。 首先研究植物向光性的是达尔文父子。 孟德尔是遗传学的伟大创始人。 1953年，沃森和克里克提出了DNA双螺旋结构模型。并在1962年与威尔金斯获得诺贝尔生理学或医学奖。 生物工程上游技术指的是基因重组、克隆和表达的设计与构建（即重组DNA技术）。 生物工程下游技术涉及到基因工程菌或细胞的大规模培养以及基因产物的分离纯化过程。 1972年，P.Berg领导的研究小组，在世界上第一次成功地实现了DNA的体外重组。 目前鉴定出三种不同类型的限制性内切酶，限制性内切酶I、II、III。基因工程中，利用的是限制性内切酶II。限制性内切酶II的识别切割序列呈典型的回文结构。一种限制性核酸内切酶叫做H i n dII，它最初发现于嗜血流感杆菌，其中H代表的是此菌的属名。限制性内切酶EcoRI的识别序列是：（红字）5‘ … G-C-T-G-A-A-T-T-C-G-A-G … 3’ 3‘ … C-G-A-C-T-T-A-A-G-C-T-C … 5’ 1978年，Chilton等首次应用分子杂交方法证明，在植物肿瘤细胞中存在农杆菌Ti质粒的一个片断，并称之为转移DNA。 在基因工程操作中，把能携带外源DNA进入受体细胞的DNA分子叫载体。基因工程中载体必须具备，在宿主细胞内能独立复制。有选择性标记。有一段多克隆位点。分子量小，拷贝数多的特性。 基因工程中常用的载体有：质粒载体、 噬菌体载体、柯斯质粒及人工染色体。 质粒可分为结合型和非结合型，结合型质粒能够自我转移。基因工程中用的是非结合型质粒。质粒的复制类型分为严紧型质粒和松弛型质粒，基因工程中用的是松弛型质粒。 不带有抗生素抗性基因的受体菌不能在含有抗生素的培养基（选择培养基）中生长。 一个质粒携带有氨苄青霉素抗性基因和卡那霉素抗性基因。利用卡那霉素抗性基因内部的EcoRI酶切位点进行人类生长激素基因的克隆。二者连接后转化对两种抗生素都敏感的大肠杆菌菌株。放入含有氨苄青霉素的培养基中若能存活，证明细菌获得了质粒。放入含有卡那霉素的培养基中若能存活，证明细菌获得了不含目的基因的质粒。 抗虫棉中的抗性基因是Bt基因。 转基因动物主要用的方法有反转录病毒法、DNA微注射法、胚胎干细胞法。 PCR的退火温度主要取决于引物。 退火温度每个循环依次降低的一种PCR，称为降落PCR。nested PCR，即巢式PCR，是指利用两套PCR引物进行两轮PCR扩增反应，增加了检测的敏感性和可靠性。 SDS中SDS的作用是屏蔽掉蛋白质在电泳过程中所带电荷的影响，使蛋白质在跑电泳时只与其蛋白质分子大小有关。 将已知的抗原或抗体标记上荧光素制成荧光标记物，再用这种荧光抗体（或抗原）作为分子探针检查细胞或组织内的相应抗原的技术称为免疫荧光技术。荧光技术则采用荧光报告基团（GFP、RFP等）进行标记。 活体体内光学成像主要采用生物发光与荧光两种技术。生物发光是用荧光素酶基因标记细胞或DNA。荧光共振能量转移技术（FRET）可用于测定原子间及分子间的距离。 膜分离技术采用半透膜作为选择障碍层。膜分离技术中，微滤、超滤、反渗透，孔径由大到小。 在纯净水与矿泉水的生产工艺中，最大的一点区别是，纯净水需要反渗透过滤，矿泉水超滤。 离子交换法中，若选择阳离子交换树脂，则带正电荷的物质与氢离子交换而结合在树脂上。 凝胶过滤中，大分子物质先排出。 清洁生产不是单纯的末端处理，而强调生产、消费的全过程统筹。 生物工程主要包括：细胞工程、基因工程、蛋白质工程、微生物工程、发酵工程、酶工程。 外植体是指植物组织培养中用来进行离体无菌培养的离体材料，可以是器官组织、细胞和原生质等。 动物细胞体外培养对于营养更加苛刻，除氨基酸、维生素、盐类、葡萄糖或半乳糖外，还需要血清。 动物细胞的培养基一般分为天然培养基、合成培养基、无血清培养基。 动物细胞培养常用的消化液为胰蛋白酶溶液和EDTA。 动物细胞的融合常用方法为仙台病毒、PEG、电融合。植物细胞的融合常用方法为PEG、电融合。 利用每一