第5章DNA损伤，修复和突变 DNA damage and repair.pptVIP

第一节 DNA损伤 一、自发性损伤（spontaneous mutations） 1、DNA复制错误 校正后的错配率仍约在10-10左右 2、互变异构(烯醇式-酮式结构互变) 3、自发性的化学变化 脱嘌呤和脱嘧啶 脱氨（基）(deamination)作用 （1）脱嘌呤和脱嘧啶 糖苷键断裂, 嘌呤和嘧啶从DNA链的核糖磷酸骨架上脱落 （2）脱氨基作用（deamination） C→U; A →H（次黄嘌呤), H--C; G →X（黄嘌呤），X--C 二、物理因素引起的DNA损伤 放射线 1、X-射线、γ射线、宇宙射线 失去电子/打断双链，破坏了碱基和糖基 2、紫外线 同一条DNA链上相邻的嘧啶以共价键连成 嘧啶二聚体 三、化学物质引起的DNA损伤 1、碱基类似物 5-溴尿嘧啶（5-bromouracil,5-BU） 氨基嘌呤（2-aminopurine 2-AP） 迭氮胸苷（AZT, azidothymidine） (1)5-溴尿嘧啶 和 T 很相似，仅在第5个碳原子上由Br取代 了甲基，5-BU有酮式、烯醇式两种异构体，可分别与A及G配对结合 （2）2-氨基嘌呤(2-AP) 也是碱基的类似物，有正常状态和稀有状 态两种异构体，可分别与T和C配对结合。当2- AP掺入到 DNA复制中时，由于其异构体的变换 而导致A∶T G ∶ C 2、亚硝酸（introus acid, NA） 有氧化脱氨作用 C?U，与A配对，G·C ? A·T A?H（次黄嘌呤），与C配对，A·T－G·C G?X（黄嘌呤），仍与C配对，不引起突变 3、烷化剂：它们的作用是使碱基烷基化 甲基黄酸乙脂（EMS）,氮芥(NM),甲基黄酸甲脂（MMS）,亚硝基胍（NG）等 4、嵌入剂 吖啶橙、原黄素、吖黄素等吖啶类染料 嵌合到DNA碱基对之间 导致单个碱基对的插入或缺失，引起移码突变 切除修复（excision repair） 错配修复（mismatch repair） 直接修复 光复活（photoreactivation） 烷基转移酶修复（alkyltransferase） 重组修复（recombinational repair） 易错修复 （一）类型： （1）核苷酸切除修复 （nucleotide excision repair, NER） --UvrABC修复 （2）碱基切除修复（base excision repair, BER） --由糖基化酶起始作用的切除修复 1、核苷酸切除修复（NER）--UvrABC修复 （1）UvrA识别损伤位点并与UvrB结合 （2）UvrA释放，UvrB与UvrC结合 （3）UvrB-UvrC复合物在损伤位点两侧切割 （4）UvrD将此区解旋 （5）DNA聚合酶、DNA连接酶填充缺口 碱基切除修复（BER） ---糖基化酶修复 （1）糖基化酶切断糖苷键， 释放出损伤碱基， 产生AP位点 （2）AP内切酶在AP位点切 开磷酸二酯键 （3）外切酶进一步切割 （4）DNA聚合酶、DNA连接 酶填充缺口 二、错配修复（mismatch repair） 在含有错配碱基的DNA分子中，使正常核苷酸序列恢复的修复方式。 1、大致环节 （1）识别错配的碱基对； （2）对错配的一对碱基要能准确区别哪一个是 错的，哪一个是对的 （母链的甲基化GA * TC） （3）切除错误的碱基，并进行修复合成。 （保存母链，修正子链） 错配修复（mismatch repair） 2、具体过程 （1）发现碱基错配 （2）MutS、MutL与碱基错配位点的DNA双链结合 （3）MutH选择性地切开非甲基化的子链 （4）DNA外切酶切除一段DNA（包括错误碱基） （5）DNA聚合酶III、DNA连接酶补齐缺口 （6）新合成链甲基化 三、直接修复 （一）光复活（photoreactivation） 可见光（300－600nm）/光解酶（PR酶） 机理：可见光激活光复活酶，分解因紫外 线导致DNA分子上形成的嘧啶二聚体。 （二）烷基转移酶修复（alkyltransferase）