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- 2017-05-21 发布于广东
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细胞遗传学实验技术标准操作规程SOP
细胞遗传学实验技术标准操作规程(SOP)
外周血培养及染色体的识别 1
白血病骨髓及外周血染色体 5
外周血细胞脆性位点检测技术 7
人羊水细胞培养收获操作程序 7
绒毛细胞培养和染色体分析 9
高分辨染色体操作方法和识别 10
GII式显带法 13
N式显带法 13
R(反式)显带法 13
姐妹染色单体互换(SCE)技术 13
荧光原位杂交操作程序 14
附:细胞遗传学实验试剂配制标准操作规程(SOP) 18
天平称量操作规程 18
药匙处理操作规程 18
PBS配制规程 18
胰酶配制规程 19
培养基配制规程 19
1N HCL 配制规程 19
1N NaOH配制规程 20
外周血培养及染色体的识别
1. 原理:
外周血中的淋巴细胞几乎都是处在G0期或G1期,一般情况下是不分裂的。当在培养基中加入植物血凝素(Phytohaemagglutinin PHA)时,这种小淋巴细胞受到刺激后转化为淋巴母细胞,并开始进行有丝分裂。经过短期培养后,用秋水仙素处理就可获得大量中期分裂相的细胞,制片后可以清楚地对染色体进行观察与分析。
2. 外周血培养与收获操作步骤:
2.1 采血:用20:1肝素(0.4%)温润无菌注射器抽取外周血5ml(注意:消毒时需脱碘)。
2.2. 种血:将注射器搓捏,使血样混匀,在无菌条件下,用7号针头垂直种血0.3ml±抗凝血(成年男子28滴,成年女子30
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