1,1DNA重组技术的基本工具上课用.pptVIP

基因工程概念 基因工程是指按照人们的意愿，进行严格的设计，并通过体外DNA重组和转基因等技术，赋予生物以新的遗传特性，从而创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。 由于基因工程是在DNA水平上进行设计和施工的，因此又叫做DNA重组技术 限制性内切酶作用过程 DNA连接酶的作用过程 基因进入受体细胞的载体 作用：将外源基因送入受体细胞。 种类： 质粒、 λ噬菌体的衍生物和动植物病毒。 3、条件： 质 粒 創造新物種科學家宣佈，只須要用三百個基因，人類也能創造新生物體。 基因工程过程示意图 限制酶切割后有两种不同的结果，一种产生黏性末端，一种产生平末端。那么恢复它们的连接时，所用DNA连接酶是否可以不加选择？ E.coliDNA连接酶：连接黏性末端 T4DNA连接酶：连接黏性末端和平末端 　被同一种限制酶切断的几个来源不同的DNA是否具有相同的黏性末端？ 二个不同的ＤＮＡ的黏性末端黏合起来，就可以合成重组的DNA分子了。 被同一种限制切断的几个DNA具有相同的黏性末端。 　　 要让一个从甲生物细胞内取出来的基因在乙生物体内进行表达，首先得将这个基因送到乙生物的细胞内去！ 三、 “分子运输车” —— 基因进入受体细胞的载体 细菌拟核DNA 质粒是一种裸露的、结构简单、独立于细菌拟核DNA之外，并具有自我复制能力的很小的双链环状DNA分子。 基因进入受体细胞的载体 假如目的基因导入受体细胞后不能复制将怎样？ 作为载体没有切割位点将怎样？ 目的基因是否进入受体细胞，你如何察觉？ 如果载体对受体细胞有害将怎样？ 作为载体的必要条件 1 能在宿主细胞内复制并稳定地保存。 2 具有多个限制酶切点以便与目的基因连接 3 具有某些标记基因 4 对受体细胞无害 5 运载体DNA大小适合，便于提取和操作 在进行基因工程操作中，真正被用作载体的质粒，都是在天然质粒的基础上进行过人工改造的。 3、基因的运输工具——运载体 能复制并带着插入的目的基因一起复制 有切割位点 有标记基因的存在，将来可用含青霉素的培养基鉴别。 练习 在基因工程中，切割运载体和含有目的基因的DNA片段，需使用（ ） 同种限制酶 B. 两种限制酶 同种连接酶 D. 两种连接酶 不属于质粒被选为基因运载体的理由是 A、能复制 （ ） B、有多个限制酶切点 C、具有标记基因 D、它是环状DNA D 练习 以下说法正确的是 （ ） A、所有的限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列 B、质粒是基因工程中唯一的运载体 C、运载体必须具备的条件之一是：具有多个限制酶切点，以便与外源基因连接 D、DNA连接酶使黏性末段的碱基之间形 成氢键 C 有关基因工程的叙述中，错误的是（ ） A、基因工程技术能定向地改造生物的遗传性状，培育生物新品种 B、重组DNA的形成在细胞内完成 C、目的基因须由运载体导入受体细胞 D、质粒都可作为运载体 B D 2和7能连接形成…ACGT… ????????????? …TGCA…； 4和8能连接形成…GAATTC… ???????????? …CTTAAG…； 3和6能连接形成…GCGC… ???????????? …CGCG…； 1和5能连接形成…CTGCAG… ???????????? …GACGTC…。 P7思考与探究 1、参考答案： 2、联系你已有的知识，想一想，为什么限制酶不剪切细菌本身的DNA？ 迄今为止，基因工程中使用的限制酶绝大部分都是从细菌或霉菌中提取出来的，它们各自可以识别和切断DNA上特定的碱基序列。 细菌中限制酶之所以不切断自身DNA，是因为在长期进化过程中形了一套完善的防御机制，可以将外源入侵的DNA降解。生物在长期演化过程中，含有某种限制酶的细胞，其DNA分子中或者不具备这种限制酶的识别切割序列，或者通过甲基化酶将甲基转移到所识别的序列的碱基上，使限制酶不能将其切开。 这样，尽管细菌中含有某种限制酶，也不会使自身的DNA切断，并且可以防止外源DNA的入侵。 3、天然的DNA分子可以直接用做基因工程载体吗？为什么？ 1）能够在宿主细胞中复制并稳定地保存，或整合到染色体的DNA上去，随染色体DNA进行同步的复制。 2）载体DNA必须有一个或多个限制酶切点，以便目的基因插入到载体上去。 3）