原核转录调控.pptVIP

第六章 原核生物基因表达的调控 本章主要内容 一、原核基因表达调控总论 基因转录成RNA再翻译成蛋白质的过程，称基因表达（expression）。对rRNA、tRNA基因来说，其表达即基因的转录。 基因表达调控受严格的调控。 怎样调控？调控的层次？ 1.1 基因的表达受调节蛋白控制 外界信号是原核生物基因表达与否的重要因素。 营养状况（N、C）；环境因素（热击、重金属等）。 调节蛋白是外界信号和表达的基因的媒介。 调节蛋白分激活蛋白（activator）和阻遏蛋白（repressor） 激活蛋白，即正调节蛋白（positive regulator），使所控制的基因表达水平上升；阻遏蛋白，即负调节蛋白（negative regulator），使所控制的基因表达下降或关闭。 1.2 基因表达调控的层次 1.3 原核生物基因表达的特性 诱导和阻遏表达 在特定环境信号刺激下，相应的基因被激活，基因表达 产物增加，这种基因称为可诱导基因(inducible gene)。 可诱导基因在特定环境中表达增强的过程，称为诱导 （induction）。 如果基因对环境信号应答是被抑制，这种基因是可阻遏 基因(repressible gene) 。可阻遏基因表达产物降低或表达 关闭的过程称为阻遏（ repression ）。 1.4 严谨控制—细菌的应急反应 能源的全面馈乏，如氨基酸饥饿，引发严谨控制； 当处于氨基酸饥饿，无法满足蛋白质的正常合成，细菌关闭大部分的代谢过程，借以渡过难关。这种现象称为严谨控制(stringent control)； ppGpp(魔斑I)和pppGpp (魔斑II)是信号；空载的tRNA是诱导物； 机制不详。 ppGpp可能与RNA pol结合；也可能与转录起始位点附近的元件结合，阻止RNA pol结合。属于转录水平的调控。 1.5 降解物对基因活性的调节 降解物阻遏 cAMP与CAP 二、转录起始的调控 2.1 转录的起始是最有效的调节环节 转录水平的调控是最主要的调控，其中转录起始的调控最重要、最有效；WHY？ 转录起始： （1）RNA Pol与启动子结合：activator帮助结合；repressor阻碍结合。如乳糖操纵子。 （2）封闭的起始复合物到开放起始复合物的转变 一些激活蛋白或阻遏蛋白在RNA POL与启动子结合后发挥调节作用。 (3) σ因子决定mRNA识别特异性 σ亚基（又称σ因子）识别特异启动序列；不同的σ因子决定不同 基因的转录激活，决定tRNA、mRNA和rRNA基因的转录。 2.2 The lactose (Lac) Operon(乳糖操纵子) 2.2.1 乳糖操纵子的结构 2.2.2 阻遏蛋白的负（性）调节 在没有乳糖存在时，乳糖操纵子处于阻遏状态； 当有乳糖存在时，乳糖操纵子即可被诱导。 2.2.3 CAP的正（性）调节 有葡萄糖存在时，细菌优先选择葡萄糖供能；葡萄糖耗尽后才开始利用乳糖。 降解物阻遏（catabolite repression） 上述现象是葡萄糖降解物引起，称降解物阻遏。 分子机制 CAP的正（性）调节（catabolite gene activation protein，或称CRP，cAMP receptor protein） 葡萄糖存在时 [cAMP]降低，因而[cAMP?CAP]降低, 抑制操纵子 转录，只能利用葡萄糖； 无葡萄糖而只有乳糖时 [cAMP]高，cAMP?CAP与操纵子的CAP位点， 激活转录，细菌利用乳糖。 2.2.4 CAP与Lac 阻遏蛋白以相同的基序同DNA结合 2.2.5 CAP的组合调控（ Combinatorial Control ） CAP 也控制其他基因的表达； CAP与不同的阻遏蛋白组合，控制不同的操纵子。 CAP在E. coli 作用于 100 多个基因。working with an array of partners. 2.3 NtrC和MerR 以及别构激活 大多数激活蛋白（activator）采取招募（recruit）的机制。如CAP招募RNA Pol； 少数采取别构激活的机制。在这种情况下，RNA Pol与启动子结合所形成的复合物是没有活性的（inactive），激活蛋白与之结合后转变成有活性的复合物。 2.3.1 NtrC NtrC具有ATPase活性，在基因上游较远的地方发挥作用； 控制N代谢相关基因的表达，如glnA（谷氨酰胺合成酶）；