ELISA-------ELISA试剂综述.docxVIP

ELISA原理ELISA利用抗原抗体之间专一性结合之特性，对标本进行检测；由于结合与固体承载物（一般为塑胶孔盘）上之抗原或抗体仍可具有免疫活性，因此设计其结合机制後，配合酵素显色反应，即可显示特定抗原或抗体是否存在，并可利用显色之深浅进行定量分析。根据待测样品与结合机制的不同，ELISA可设计出各种不同类型的检测方式，主要以三明治法(sandwich)、间接法(indirect)、以及竞争法(Competitive)三种为主，以下为各种方法之介绍。ELISA分类见ELISA的双抗夹心法原理；ELISA的双抗夹心法，又称三明治法三明治法常用于检测大分子抗原，一般之操作步骤为:将具有专一性之抗体固着(coating)于塑料孔盘上，完成後洗去多馀抗体；加入待测标本，标本中若含有待测之抗原，则其会与塑料孔盘上的抗体进行专一性结合；洗去多馀待测标本，加入标记有酵素之二次抗体，与抗原结合；洗去多馀未结合的二次抗体，加入酵素受体使呈色，以肉眼或仪器读取显色结果三明治法分别以两种抗体对标本中的抗原进行两次专一性辨认，因此专一性相当高，但此待测抗原必须是多价抗原，如此才可获得两种以上的专一性抗体，以分别进行夹心；而且此法需要足够的表位空间以进行抗原抗体的夹心，所以并不适用于半抗原或小分子抗原等分子量较小之标的。?ELISA双抗夹心法的衍生方法如ABC法ELISA的生物素 -亲和素系统，该产品系列是检