生物制药之基因工程均的培养工艺课件.pptVIP

基因工程菌的培养工艺 王林 唐霜 王良蕾 许蔚 徐元坤 发酵生产目的： 1、获得大量外源基因产物 2、减少宿主细胞本身蛋白质的污染 要求外源基因高水平表达 宿主、载体和克隆基因之间的相互关系及其所处的环境条件 培养基的影响 1 接种量的影响 2 温度的影响 3 溶解氧的影响 4 PH的影响 7 诱导时机的影响 5 诱导表达程序的影响 6 培养基为基因工程菌的生长和外源基因的表达提供一切能源物质。培养基的组成既要提高工程菌的生长速率，又要保持重组质粒的稳定性，使外源基因能够高效表达。 ①碳源：葡萄糖、甘油、乳糖、甘露糖及果糖等。 使用不同的碳源对菌体生长和外源基因表达有较大的影响。（见教材） ②氮源：酵母粉、蛋白胨、酪蛋白水解物、玉米浆和氨水、硫酸铵、硝酸铵、氯化 铵等。（酪蛋白水解物作为氮源有利于产物的合成和分泌） 培养基的影响 1 ③其他：无机盐、微量元素、维生素、生物素等，营养缺陷型菌株还要补加相 应的营养物质。 无机磷是许多初级代谢的酶促反应的效应因子，（如：DNA、RNA、蛋白质的合成，糖代谢、细胞呼吸、及ATP的水平控制），过量的无机磷会刺激葡萄糖的利用、菌体的生长和氧的消耗，但会影响目的基因的表达。即浓度低影响菌体的生长，浓度高外源基因不表达，故起始磷酸盐浓度应一般控制在0.015