王娜--常用染色方法.pptVIP

常用的染色方法 主要内容 瑞氏染色法 网织红细胞染色方法 革兰染色法 抗酸染色法 * 瑞氏染色法 一、概述： 瑞氏染色法是目前最常用的血涂片染色方法。其染料由酸性伊红和碱性美蓝组成，美蓝和伊红的水溶液混合后，产生一种不溶于水的伊红化美蓝中性沉淀（ME），即瑞氏染料。将适量的ME溶解于甲醇中，即成为瑞氏染液。 * 瑞氏染色法 二、细胞着色原理： 既有物理的吸附作用，又有化学的亲和作用。各种细胞成分化学性质不同，对各种染料的亲和力也不一样。如血红蛋白、嗜酸性颗粒为碱性蛋白质，与酸性染料伊红结合，染粉红色，称为嗜酸性物质；细胞核蛋白、淋巴细胞、嗜碱性粒细胞胞质为酸性，与碱性染料美蓝或天青结合，染紫蓝色或蓝色，称为嗜碱性物质；中性颗粒呈等电状态与伊红和美蓝均可结合，染淡紫红色，称为嗜中性物质、原始红细胞、早幼红细胞胞质、核仁含较多酸性物质，染成较浓厚的蓝色；中幼红细胞既含酸性物质，又含碱性物质，染成红蓝色或灰红色；完全成熟红细胞，酸性物质彻底消失后，染成粉红色。 * 瑞氏染色法 三、操作： 1. 制作血液或脱落细胞涂片，自然干燥固定； 2. 用蜡笔在血膜两头划线，滴加瑞氏染液3～5滴以覆盖整个血膜，固定1～2分钟；滴加等量或稍多的缓冲液（未加缓冲液涂片上有染料颗粒残留），吸球吹匀或摇动玻片染色5～10分