第八章 与吸光光度法.docVIP

第八章 吸光光度法 基于物质对光的选择性吸收而建立的分析方法称为吸光光度法。包括比色法、可见及紫外分光光度法等。本章主要讨论可见光区的吸光光度法。利用可见光进行分光光度法分析时，通常将被测组分通过化学反应转变成有色化合物，然后进行吸光度的测量。例如：测量钢样中Mn的含量，在酸性溶液中将Mn?氧化§8-1 吸光光度法基本原理 物质对光的选择吸收 当光束照射到物质上时，光与物质发生相互作用，产生了反射、散射、吸收或透射（p241, 图9-1）。 若被照射的是均匀的溶液，则光在溶液中的散射损失可以忽略。 当一束由红、橙、黄、绿、青、蓝、紫等各种颜色的光复合而成的白光通过某一有色溶液时，一些波长的光被溶液吸收，另一些波长的光则透过。当透射光波长在400-700nm范围时，人眼可觉察到颜色的存在，这部分光被称为可见光。透射光和吸收光呈互补色，即物质呈现的颜色是与其吸收光呈互补色的透射光的颜色。例如：CuSO4溶液由于吸收了580-600 nm的黄色光，呈现的是与黄色呈互补色的蓝色。不同波长的光具有不同的颜色，见P294,表9-1。 物质吸收了光子的能量由基态跃迁到较高能态（激发态），这个过程叫做物质对光的吸收。 M（基态）+hυ → M*(激发态) 当照射光光子的能量hυ与物质的基态与激发态能量之差相等时，即ΔE= hυ，才能发生吸收。不同的物质由于结构不同而具有不同的能级差，所以吸收不同波长的光。物质对不同波长光吸收能力的分布情况，称为吸收曲线，也称为吸收光谱。吸收曲线以波长为横坐标，吸光度为纵坐标。每种物质的吸收曲线，一般都有一个最大吸收峰，最大吸收峰所对应的波长叫做最大吸收波长λmax。 由P242,图9-3可以看出：不同浓度的1，10-邻二氮杂菲亚铁溶液对不同波长的光吸收情况不同，其最大吸收波长位于510nm，即吸收的是绿光，呈现的是相应的互补色橙红色。当溶液浓度增大时，吸光度增大，但最大吸收波长λmax不变。在吸光光度法分析中，一般都在最大吸收波长处测量吸光度。 光吸收的基本定律 朗伯-比耳定律 1729年波格（Bouguer）））·g-1·cm-1。 当c的单位为mol/L,则此时吸光系数称为摩尔吸光系数，用κ表示，单位为L·mol-1·cm-1，它表示1mol/L吸光物质，溶液的厚度为1cm时溶液对光的吸收能力。 则 A=κbc κ = M a 在分光光度分析的实际工作中，不能直接取1mol/L这样高的浓度测定摩尔吸光系数κ值，而是在适宜的低浓度下测量吸光度A，然后通过计算求出κ值。 例：铁（II）浓度为5.0×10-4g /L,与1，10-邻二氮杂菲反应生成橙红色的配合物，该配合物在波长508nm，比色皿厚度为2cm时，测得A=0.19,计算该配合物的a及κ。 解：a=A/bc=0.19/(2×5.0×10-4)=190L·g-1·cm-1 κ=A/bc=0.19/(2×5.0×10-4/55.85) =1.1×104 L·moL-1cm-1 或κ = M a＝55.85×190=1.1×104 L·moL-1cm-1 通常认为κ104的显色反应是灵敏的，κ103则是不灵敏的。 吸光度具有加合性，即体系总的吸光度等于各组份吸光度之和（设各吸光物质之间没有互相作用）。 A总=A1+A2+……..An =κ1bc1+κ2bc2+……. κnbcn 在吸光度的测量中，有时也用透光率或透光度表示物质对光的吸收程度。透光率以T表示: T=I/I0 , 则吸光度与透光率之间的关系为A=lgI0/I=lg1/T 。 2、偏离朗伯-比耳定律的原因 根据朗伯-比耳定律，当吸收池厚度保持不变，以吸光度对浓度作图时，应得到一条通过坐标原点的直线，该直线称为标准曲线或工作曲线。在相同条件下测得试液的吸光度，从工作曲线上就可以查得试液的浓度。但在实际工作中，常常遇到偏离线性关系的现象，特别是在溶液浓度较高时，常会出现标准曲线向上或向下弯曲产生负偏离或正偏离（p244,图9－4）。 偏离朗伯-比耳定律的因素可分为物理因素和化学因素两大类。 物理因素 （1）单色光不纯 朗伯-比耳定律的基本假设是入射光为单色光，但目前光度分析仪器中，用单色器分光，用狭逢控制光谱带的宽度，因而投射到吸收溶液的入射光，常常是一个有限宽度的光谱带，而不是真正的单色光。由于物质对不同波长光的吸收程度不同，因而引起了对朗伯-比耳定律的偏离。见P245，图9-5。详细推导见P244-245。 (2)非平行光或入射光被散射 若入射光不垂直通过吸收池，就使通过溶液的实际光程大于吸收池厚度。此外，入射光发生散射，实测吸光度增大，导致偏离朗伯-比耳定律。 化学因素 (1) 粒子间相互作用 朗伯-比耳定律的基本假设，除要求入射光是单色光外，还假设吸收粒子