考研必备《生物化学》11rna的生物合成.pptVIP

第十一章 RNA的生物合成 五种亚基的功能分别为 α亚基：与启动子结合功能。 β亚基：含催化部位，起催化作用， 催化形成磷酸二酯键。 β′亚基：与DNA模板结合功能。 σ亚基：识别起始位点。 ?亚基：在全酶中存在，功能不清楚。 大肠杆菌RNA聚合酶的结构示意图 RNA聚合酶Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ都由多个 亚基组成。有些亚基是三种酶所共有。 　　mRNA是各种RNA中寿命最短、 最不稳定的，需经常重新合成。因此RNA聚合酶Ⅱ是三种酶中最活跃的。 原核生物启动子 真核生物启动子 顺式作用元件 真核生物结构基因上游的调控区 存在的一致性DNA序列。 反式作用因子 直接或间接辨认、结合顺式作用 元件并影响其功能的蛋白质。 大肠杆菌两类终止子的回文结构 有些终止子的作用可被特异的因子所阻止，使酶得以越过终止子继续转录，称为通读. 能够引起抗终止作用的蛋白质称为抗终止因子。 RNA合成过程 RNA编辑的不同类型和分布 RNA的拼接方式 原核生物的mRNA转录后一般不需要加工，转录的同时即进行翻译（半寿期短）。亦有少数多顺反子的mRNA需要核酸酶切成小单位，然后再翻译。 原核生物可能为适应快速生长的需要在生物进化过程中将内含子丢掉了。 原核生物中rRNA前体的加工 核酶研究的意义 核酶的发现，对中心法则作了重要补充； 核酶的发现是对传统酶学的挑战； 利用核酶的结构设计合成人工核酶 。 内含子剪接的生物学意义 ?与生物发育和分化有关，是生物进化的结果。 ?是基因表达调控的一种重要方式。 ?基因由模块装配而成，模块间的间隔顺序演变成内含子。 ?内含子促进了重组，避免重组错位造成的基因失活，增加基因组复杂性。 ?内含子和外显子是相对的。 二、tRNA的转录后加工 原核与真核生物的tRNA转录后都需要加工。包括： （1）由核酸内切酶切除前体上3?和5?端上多余的核苷酸； （2）由核酸外切酶逐个在3?切去附加序列，进行修剪。 （3）3’端添加CCAOH序列，由核苷酰转移酶催化。 （接受活化AA） （4）核苷的一些特定的碱基和戊糖进行修饰。 剪切 (a) 剪接 (b) (c) 添加 碱基修饰 (d) 碱基修饰的方式： （2）还原反应 如：U ? DHU （3）核苷内的转位反应 如：U ? ψ （4）脱氨反应 如：A ? I 如：A ? mA （1）甲基化 （1） （1） （3） （2） （4） POL-Ⅱ TFⅡF ⅡA ⅡB 形成转录起始复合物 POL-Ⅱ TFⅡF ⅡH ⅡE TBP TAF TFⅡD-ⅡA-ⅡB-DNA复合物 TATA ⅡA ⅡB TBP TAF TATA ⅡH ⅡE CTD- P PIC组装完成，TFⅡH使CTD磷酸化 二、转录延长 1 、? 亚基脱落，RNA – pol 聚合酶核心酶变构，与模板结合松弛，在DNA模板上3′→5′方向前移； 2 、在核心酶作用下，NTP逐个加到RNA链的3‘-OH端，RNA链沿5′→3′延伸。 (NMP) n + NTP ?? (NMP) n+1 + PPi DNA上的解螺旋区：在RNA链延伸的同时，RNA聚合酶继续解开它前方的DNA双螺旋，暴露出新的模板链，而后面被解开的两条DNA单链又重新形成双螺旋，DNA上的解螺旋区保持约17个碱基对的长度。 RNA-DNA杂交区：刚合成出来的RNA链与解开的DNA模板链之间可形成一小段RNA-DNA杂交区，长度约12bp。随着核心酶的移动，杂交区也往前延伸，保持着固定一小段。 转录复合物 : RNA-pol (核心酶) ···· DNA ···· RNA 解链 复链 负超螺旋 正超螺旋 5? 3? DNA 原核生物转录过程中的现象 核糖体 RNA RNA聚合酶 RNA-Pol RNA-Pol RNA-Pol 核小体 真核生物转录延长中的核小体移位现象 转录方向 三 、转录终止 --- RNA聚合酶在DNA模板上停止前进，转录产物RNA链从转录复合物上脱落下来。 终止子-- 在DNA分子上（基因末端）提供转录停止信号的DNA序列，它能使RNA聚合酶停止合成RNA并释放出RNA。 DNA模板上靠近终止处，有些特殊的碱基序列，转录出RNA后，RNA产物形成特殊的结构来终止转录。 1、原核生物的转录终止 (1) 依赖 ρ 因子(Rho) 的转录终止(弱终止子) (2)不依赖 ρ 因子的