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考研科目,动物生物化学第14章rna的生物合成-转录
第14章 RNA的生物合成-转录 重点与难点: 原核生物转录的过程 原核与真核生物转录的区别 RNA的加工 1.1 转录(transcription)的概念 (3) 启动子(promoter) 1.2 转录的特点 (1)以 DNA为模板,在RNA聚合酶的作 用下合成RNA。 (2)转录具有不对称性; (3)转录不需要引物,方向5′到3′; (4)转录的忠实性相对弱; (5)转录首先得到RNA前体,然后再进 行加工转变为成熟的RNA。 不对称转录(一条链被转录) 反义链(模板链,负链):在RNA的 转录中,用作模板的DNA链称为反义链。 有义链(编码链,正链):在RNA的 转录中,不作为模板的DNA链称为有义链。 2.1 RNA聚合酶(RNA-pol) 2.2 启动子(promoter) 3 真核生物的转录 真核生物转录比原核复杂,主要区别: (1)转录与翻译在不同区域: 原核:转录与翻译偶联进行。 真核:转录在细胞核,翻译在核外。 ① RNA聚合酶Ⅰ负责rRNA(5.8S、18S、 28S)的转录 ② RNA聚合酶Ⅱ负责mRNA的转录 ③ RNA聚合酶Ⅲ负责tRNA和5SRNA的 转录 在远离调控基因处存在,一般在-100 处能够增强基因转录活性的调控序列称为 增强子(enhancer)。 由RNA聚合酶合成的原初转录物往往需要一系列的变化。包括: (1) 链的裂解 (2) 5?和3?末端的切除和特殊结构的形成 (3)核苷的修饰 (4)拼接和编辑等过程。 原核生物:mRNA 半衰期短,转录 的同时即进行翻译,转录后一般不需要 加工。 A mRNA首尾修饰 3′端添加polyA “尾巴” 5′端连接“帽子”(m7G5?ppp5?NmpNp-) B mRNA的剪接 5‘-加帽(adding cap):即在mRNA 的5‘-端加上m7GTP的结构。 首先是在磷酸酶的作用下,将5‘-端的 磷酸基水解,然后再加上鸟苷三磷酸,形 成GpppN的结构,再对G进行甲基化。 真核细胞中有四种, 28s 、18s、5.8s 和 5s,前三种形成一个转录单位,位于核仁中。 5s rRNA 基因位于核仁之外,处在另一个转 录单位中。 rRNA前体的转录和剪接加工 5 核酶(ribozyme) ①核酶的发现,对中心法则作了重要补充; ②核酶的发现是对传统酶学的挑战; ③利用核酶的结构设计合成人工核酶 。 思考题 1 转录、转录单位、启动子、-35序列、Pribnow盒、TATA框、CAAT框、增强子、 外显子、内含子、剪接、核酶。 2 转录的特点。 3 简述原核生物转录的起始和延长。 4 原核生物和真核生物转录的区别。 5 原核生物和真核生物转录后RNA加工的区别。 B RNA的剪接 原核与真核的tRNA转录后加工类似。 但真核生物tRNA前体含有插入顺序,原 核生物没有。 (2) tRNA前体的加工: 原核生物tRNA的加工需要切除5’ 和 3’ 端多余的顺序。有些 tRNA 前体在 3’ 端没 有 CCA 基团,在成熟过程中需要加一个 CCA(氨基酸结合部位)。 A. 剪接和剪切 B. 3′端添加CCA C. 化学修饰 真核生物tRNA的加工方式: RNAaseP、内切酶 A 剪接和剪切 tRNA核苷酸转移酶、连接酶 ATP ADP B 3′端添加CCA C 化学修饰 b 还原反应 如:U ? DHU c 核苷内的转位反应 如:U ? ψ d 脱氨反应 如:A ? I 如:A ? Am a 甲基化 a a c b d 原核:三种核蛋白体(16S、23S和5S rRNA)在一起形成一个转录单位,中间由一个或多个tRNA隔开。 先形成30SrRNA前体,然后核糖核酸酶切割、剪接和甲基化变为成熟的rRNA。 (3) rRNA的加工 原核rRNA的加工 真核生物的 rRNA 转录后加工 真核生物 (1)概念 具有酶促活性的 RNA 命名为核酶 (2)发现
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