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目录 五、我对这篇文献的整体评价 * Biomolecular robotics for chemomechanically driven guest delivery fuelled by intracellular ATP 汇报人：李 涛 汇报时间：2013年12月21日 由细胞内ATP激发导致客体释放的生物分子机器人 作用的化学机制 ATP 文章概要 纳米管（NT）是怎么组装的 ATP对纳米管的作用机制探究 纳米管的运载性能 纳米管的应用前景 我对这篇文献的整体评价 一、纳米管（NT）是怎么组装的？ NT的结构单元：一类重要的蛋白——分子伴侣 1.概念：分子伴侣是指能够结合和稳定另外一种蛋白质的不稳定构象,并能通过有控制的结合和释放,促进新生多肽链的折叠、多聚体的装配或降解及细胞器蛋白的跨膜运输的一类蛋白质 。作为伴侣蛋白的一种，GroEL是研究比较深入的存在于细菌内的一种伴侣蛋白。 2.GroEL的结构： GroEL蛋白是同型寡聚复合物，由14 个相对分子质量58 ×103 的亚基组成,形成两层垛叠的背靠背双环组成的中空圆柱结构,每个环由7 个亚基组成。 1.顶端结构域 位于圆柱两端的顶端开口处，是底物的结 合位点 2.赤道结构域 含有ATP的结合位点 3.铰链结构域 在顶端结构域和赤道结构域间传递构象变化 3.GroEL具有别构效应 ——引自张经余、赵志虎、蔡民华《GroEL 分子伴侣研究进展》2001年5月 GroELMC的制备 GroEL的突变体GroELCys 经部花青修饰的分子伴侣GroELMC 解决问题的具体过程 纳米管NT的组装 MC Mg2+ MC 两性的部花青单元 GroELCys (GroEL mutant) GroELMC 影响纳米管长度的因素 GroELCys顶端结构域中-SH残基被MC功能化的程度是影响NT长度的重要因素。 尺寸排阻色谱 SH/MC-conversion=82% 每个NT中平均含20个重复的GroELMC单元 SH/MC-conversion=100% 每个NT的长度可长达2.5μm 影响纳米管长度的因素 二、ATP对纳米管的作用机制探究 纳米管在细胞内ATP的激发下裂解 在细胞内ATP的激发下，NT的确发生了裂解 ATP的作用位点在GroELCys上 影响细胞内ATP激发下纳米管裂解的因素 ATP SH/MC-conversion =82% SH/MC-conversion =100% 裂解效果优于 ATP 解决问题的具体过程 ATP类似物与NT作用的探究 CTP和UTP作为ATP的类似物，与GroEL作用时，能够引起其构象变化，而ITP和GTP却不能。 NT另一种断裂机制的比较 EDTA EDTA的这种作用机制虽然也能使NT解离，但是这种解离机制明显比之前说到的ATP作用的解离机制效率要低很多，因为实验发现要达到同等程度的解离，EDTA的浓度要是ATP浓度的250倍。 而lgKMg-ATP=4.06,lgKMg-EDTA=8.7，因此排除了ATP的作用位点在Mg2+这一可能机制 解决问题的具体过程 ATP激发下的NT断裂机制深究 ATP激发下的NT的裂解机制：即ATP结合到GroEL赤道结构域的ATP结合位点，引起GroEL构象发生变化，这一构象变化会产生5-60pN的微弱张力，这一张力虽然微弱，但足以切断GroEL间的非共价相互作用，导致NT裂解。 三、纳米管的运载性能 NT载客实验初探 以GFPdenat作为实验客体 ATP 解决问题的具体过程 客体GFPdenat成功装载于NT的表征 解决问题的具体过程 客体GFPdenat成功释放的表征 解决问题的具体过程 客体释放的动力学影响因素——ATP的浓度 ATP的浓度与客体释放情况的定量关系 ——S形曲线 四、纳米管的应用前景 基于细胞内外ATP的浓度差异的相关应用 生物体内的不同部位ATP的分布具有很大的差异 如： 细胞内ATP浓度：1-10 mM 细胞外ATP浓度：5 uM 肿瘤组织中细胞外ATP浓度：700 uM 肿瘤组织中细胞外ATP浓度：5 uM 另外发炎的组织