原创力文档- 1、原创力文档（book118）网站文档一经付费（服务费），不意味着购买了该文档的版权，仅供个人/单位学习、研究之用，不得用于商业用途，未经授权，严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等，侵权必究。。
- 2、本站所有内容均由合作方或网友上传，本站不对文档的完整性、权威性及其观点立场正确性做任何保证或承诺！文档内容仅供研究参考，付费前请自行鉴别。如您付费，意味着您自己接受本站规则且自行承担风险，本站不退款、不进行额外附加服务；查看《如何避免下载的几个坑》。如果您已付费下载过本站文档，您可以点击 这里二次下载。
- 3、如文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等，请点击“版权申诉”（推荐），也可以打举报电话：400-050-0827(电话支持时间：9:00-18:30)。
- 4、该文档为VIP文档，如果想要下载，成为VIP会员后，下载免费。
- 5、成为VIP后，下载本文档将扣除1次下载权益。下载后，不支持退款、换文档。如有疑问请联系我们。
- 6、成为VIP后，您将拥有八大权益，权益包括：VIP文档下载权益、阅读免打扰、文档格式转换、高级专利检索、专属身份标志、高级客服、多端互通、版权登记。
- 7、VIP文档为合作方或网友上传，每下载1次， 网站将根据用户上传文档的质量评分、类型等，对文档贡献者给予高额补贴、流量扶持。如果你也想贡献VIP文档。上传文档
查看更多
细胞生物学与遗传学教研室 遵义医学院 2009年9月研制 第二次实验 Ⅰ 细胞内酸性蛋白和碱性蛋白的原位显示 Ⅱ 细胞内DNA和RNA的原位显示 [实验目的] 1.掌握酸、碱性蛋白以及DNA和RNA在细胞内的分布情况； 2.了解酸、碱性蛋白以及DNA和RNA显色反应的原理和方法。 [实验原理] 由于不同蛋白质分子所带酸性基团和碱性 基团数量不同，生理条件下，整个蛋白质 带负电荷多则为酸性蛋白，带正电荷多则 为碱性蛋白。可用不同pH值的固绿染色， 即可显示细胞内酸性蛋白或碱性蛋白。 核酸的存在会影响实验结果 用三氯醋酸处理 甲基绿和派洛宁是互不混淆、互不影响的两种染色剂，由于其自身分子结构的特点，它们可与两种聚合程度不同的核酸竞争性结合，从而同时显示细胞内DNA和RNA的分布部位。 [实验用品] 95%乙醇 三氯醋酸 甲基绿-派洛宁 0.1%酸性固绿 0.1%碱性固绿 [操作流程] 暴露 胸腔 双毁髓法处死 取心脏血 晾干 制 血涂片 固定10min 90℃25min 洗涤1min 反复冲洗 三氯醋酸 95%乙醇 0.1%酸性固绿 5min 0.1%碱性固绿 30min 晾干 镜检 冲洗5秒 晾 干 洗 涤 甲基绿派洛宁 5min 染 色 冲洗 5 秒 [结果观察] 酸性蛋白 碱性蛋白 DNA和RNA的显示 使用三氯醋酸处理的目的 两人一组，每组制三张血涂片 [注意事项] 请回答细胞化学法在本次实验中的应用。 通过本次实验学到哪些基本操作技能？ 请描述本次实验的显微观察结果。 [作业] [小结] 评价本次实验的得失 本次实验需要巩固的概念 细胞化学法 本次实验需要掌握的实验技能 1. 双毁髓处死蟾蜍的方法 2. 血涂片制作方法 3. 染色的规范操作方法 4. 洗涤方法（流水冲洗） 5. 正确的镜检方法（显微观察技术）
文档评论（0）