免疫学课件第22章免疫学检测技术的基本原理.pptVIP

免疫学检测技术的基本原理 抗原抗体反应的特点 高度特异性 抗原表位与抗体分子中超变区互补结合 表面化学基团之间的可逆结合 空间构象互补；通过氢键、静电引力、范德华力及疏水键等非共价的可逆结合。 适宜的抗原抗体浓度和比例 抗原抗体反应的两个阶段 抗原抗体结合的特异性阶段。数秒钟至几分钟。 可见反应阶段。数分钟至数日。 抗原抗体反应的特异性 亲和力affinity：抗体分子上一个抗原结合部位与相应抗原决定基之间的结合强度。 亲合力avidity：一个抗体分子与整个抗原之间的结合强度。 非共价的可逆结合 抗原抗体反应的可见性 抗原抗体反应的影响因素 电解质 适当浓度的电解质会令沉淀反应更易出现，如0.85%NaCl。 温度 温度越高，出现可见反应的速度越快 37℃ pH 6~8之间 凝集反应 沉淀反应 免疫标记技术 凝集反应 agglutination reactions 颗粒性抗原与相应抗体结合形成凝集团块 mg/ml 直接凝集 间接凝集 直接凝集-玻片凝集试验 正向间接凝集实验 反向间接凝集试验 Coombs test 沉淀反应 可溶性抗原与相应抗体结合出现沉淀物 20mg/ml～2mg/ml 单向琼脂扩散 双向琼脂扩散 免疫电泳 免疫比浊 单向免疫扩散 含有一定浓度抗体的琼脂凝胶。 沉淀环直径与抗原浓度正相关。 双向免疫扩散 根据沉淀线形状，可鉴定两种抗原是否相同。 免疫电泳