第五章白细胞抗原系统检测.pptVIP

CWD原则 HLA等位基因定义为三大类 常见等位基因（Common alleles） 指那些在参考群体中频率大于0.001的等位基因 确认等位基因（Well-documented alleles） 至少在五个独立非亲缘个体中或者三个独立非亲缘个体中并伴有特定的单体型被检测到的等位基因 罕见等位基因（Rare alleles) 除常见等位基因和确认等位基因以外的所有等位基因 它们的频率很低 CWD原则 CWD原则 CWD原则分型中将常见等位基因和确认等位基因合并为CWD,当模棱两可的等位基因组合中出现CWD等位基因可能需要进一步区分，而出现罕见等位基因组合，其临床分型中实际意义有限，可予以排除 单链DNA抽提技术 单链DNA抽提技术将个体两个等位基因进行分离 根据等位基因序列设计生物素标记的特异性探针（仅与某一等位基因互补） 探针与标本基因组DNA进行杂交反应 杂交后将形成单一等位基因DNA/特异性探针复合物 加入链亲和素标记磁珠，将形成单一等位基因DNA/特异性探针/磁珠复合物 洗涤后溶液中只含有单一等位基因DNA/特异性探针/磁珠复合物 单链DNA抽提技术 单链分离技术 探针结合杂交互补 选择性获取单体型 商业产品 HLA-C*01:02 Biotin-CTC CAT gAA gTA TTT CTT CA 图为单链抽提C*01:02后测序的一段序列 单链扩增技术 该技术原