cDNA合成（逆转录）试剂盒使用说明书.PDFVIP

Rayscript cDNA Synthesis Kit User Manual cDNA 合成 （逆转录）试剂盒使用说明书 I. 产品组成 产品组成 GK8030-20 GK8030-50 GK8030-100 25ul X 20 reactions 25ul X 50 reactions 25ul X 100 reactions 200 U/µl M-MLV Reverse Transcriptase 1X20 ul 1X50 ul 2X50 ul (RNase H-) 5 × RT Reaction Buffer 1X100 ul 1X250 ul 2X250 ul 25 U/µl RNase Inhibitor 1X20 ul 1X50 ul 2X50 ul 25 mM dNTP 1X20 ul 1X50 ul 2X50 ul 60 µM Oligo (dT)18 1X20 ul 1X50 ul 2X50 ul 250 µM Random Primer 1X20 ul 1X50 ul 2X50 ul dd H O (RNase and DNase 2 free) 1X1 ml 1X1 ml 1X1 ml II. 储存条件 收到试剂盒后，请置于-20℃保存。本产品于-20℃条件下至少可稳定保存一年。为保证使用效果，请注意 避免多次反复冻融。 III. 产品介绍 Rayscript cDNA Synthesis Kit 包含逆转录酶和一整套特殊试剂组合，其cDNA产物适用于基因克隆、 cDNA文库构建，以及定量PCR扩增。本产品是根据可靠实验设计、研发的通用性第一链cDNA合成 （逆转录） 试剂盒，适用于大多数来源的RNA。 本产品使用的莫洛尼鼠白血病病毒逆转录酶 （RNase H– ）是一种依赖于RNA 的DNA聚合酶，被用于长链 RNA模板 （13 kb ）的cDNA合成。这个应用过程中，RNase活性的缺失非常重要，因为这种活性在合成长链 cDNA所必须的长时间的温育过程中会使模板降解。这种活性的缺失，可用于生产长链cDNA和构建含高比例 全长cDNA 的文库。 IV. 实验前准备 注意！在处理化学制品前，请穿戴实验服、一次性手套和护目镜。 RNA样品准备 避免溶剂、耗材及实验器具中存在RNase，对于RNA相关实验是至关重要的。在准备RNA样品全过程中， 需要戴上口罩和手套。小心仔细的按照选择的RNA提取流程进行操作。实验中可购买无RNase的即用型试剂 使用，或者将溶剂用DEPC （焦碳酸二乙酯）处理后再经过高压灭菌亦可。实验器具上的RNase可经过250°C 干燥3小时灭活。包括微量离心管、移液器吸头等全部耗材用DEPC处理后，再经过高压灭菌以灭活RNase方 可使用，同样可购买无RNase的耗材产品使用。 注意事项： Ÿ 为保证使用效果，试剂盒保存于–20 °C，避免储存或放置于4°C 或室温条件下。 Ÿ 轻柔颠倒离心管数次以使试剂混合均匀，避免产生泡沫，短暂离心后备用。 Ÿ 按照实验