儿童肺炎支原体感染3种检测方法对比分析.pdf

现代医药卫生2017年 1月第 33卷第2期 JModMedHealth，January2017，Vo1．33，No．2 儿童肺炎支原体感染3种检测方法对比分析 龚亚东，马庆庆 ，林 牧(贵州航天医院中心实验室，贵州 遵义 563000) 摘【 要】 目的 比较肺炎支原体 (MP)3种检测方法检测结果，探讨其在呼吸道感染患儿不同年龄、病程 中的应用 价值 。方法 选择 2015年 8月至 2016年 1月在该 院住院治疗的呼吸道感染惠儿 124例 ，均行 MP咽拭子快速培养 、血 清酶联免疫吸附试验 (EUSA)检测MP一免疫球蛋 白M(IgM)和支气管灌洗液实时荧光定量聚合酶链反应 (rQ．PCR)检 测 ，对检测结果进行对 比分析 。结果 l24例患儿 中，咽拭子快速培养检 出MP阳性 28例 (22．58％)，EUSA检 出MP-IgM 阳性34例(27．42％)，支气管灌洗液rQ—PCR法检出MP阳性72例(58．06％)。咽拭子快速培养法和FQ．PCR检测不同年龄 段 患儿 MP阳性率比较 ，差异无统计学意义(P0．05)。ELISA检测 MP．IgM在不同各年龄段 中检 出MP阳性率 比较 ，差异 均有统计学意义 (尸0．05)；且随着年龄的增加 ，血清ELISA检测MP-IgM阳性率越高。3种方法检测不同病程惠儿MP感 染阳性率比较 ，差异均无统计学意义( O．05)。结论 3种方法联合检测可以提 高MP感染的检 出率。 【关键词】 肺炎，支原体胗 断； 咽／微生物学； 支原体，肺炎／分离和提纯； 酶联免疫吸附测定； 聚合酶链反应 doi：10．3969／j．issn．1oo9—5519．2017．02．030 文献标识码：B 文章编号：1009—5519(2017)02．0251-03 肺炎支原体 (mycoplasmapneumoniae，MP)是引起 JL,I!I部分泌物，使用无菌生理盐水处理采集好的咽拭子 呼吸道感染的常见病原体 ，在儿童原发性非典型肺炎 标本，并接种到预温的培养基中，观察 24h后培养结果， 和社区获得性肺炎中最为常见 ]。虽然 MP感染后有一 若培养液颜色 由之前的红色变为黄色则判定结果为阳 定特殊的临床表现和影像学变化 ，但是 由MP、病毒或 性，而培养液颜色始终保持原有的红色不变则判定结果 细菌等病原体引起的儿童呼吸道感染临床症状往往相 为阴性 。 似 ，难 以鉴别，从而延误临床治疗[21。目前实验室常用的 1-2．4 支气管灌洗液FQ．PCR检测 采用感染患儿支 检测方法在时间上存在一定 的局 限性 ，不利于早期诊 气管灌洗液，所取标本经过震荡混匀、离心沉淀，吸取上 断和治疗 。本研究对 比分析MP咽拭子快速培养、血清 清液 ，再加入细胞裂解液提取 DNA后进行 PCR扩增 ， 酶联免疫 吸附试验 (ELISA)检测 MP一免疫球蛋 白M 标本核酸提取的全过程严格按试剂说明书操作，结果判 (IgM)、实时荧光定量聚合酶链反应 (VQ—PCR)3种实验 定扩增 曲线呈 “S”形且 CT值小于 36为阳性 。 室检测方法检测结果3[1，为临床诊断提供依据。 1．2．5 血清 ELISA检测MP-IgM 采集入院感染患儿 1 资料与方法 静脉血 2mL，采用 ELISA进行MP-IgM检测。 1．1 一般资料 选择2015年8月至2016年 1月在本 1．3 统计学处理 应用 sPSS13．O统计软件进行数据 院住 院治疗 的呼吸道感染患儿 124例 ，其 中男 76例 ， 分析 ，计数资料 以率表示，采用 检验 ，P0．05为差异 女48例 ；年龄 1个月至 l2岁，中位年龄 31个月；病程 有统计学意义。 7-28d。所有患儿均有发热和咳嗽症状。 2 结 果 1．2 方法 2．1 3种方法检测结果 比较 124例受检患儿中，MP 1．2．1 研究方法 (1)采用MP咽拭子快速培养、血清 咽拭子快速培养检出阳性 28例 (22．58％)，血清 EUSA ELISA检测 MP．IgM 和支气 管灌洗 液 VQ—