5发育与遗传及基因表达调控.ppt

* 同一基因转录可受不同增强子调控(编号1~6)，以便对不同信号作出反应；有的基因具有几个增强子，而有的可能没有。 同一增强子可与不同启动子进行竞争性互作： 如：人血红蛋白基因，控制胎儿γ链和成人β链两基因共用同一个增强子，它与不同的启动子结合导致不同的基因表达。 增强子主要功能：与转录因子（有称转录激活子）结合，改变染色质的构型，从而利于与启动子接触提高mRNA合成效率。 2、反式作用因子 1）概念：能直接或间接地识别或结合在各类顺式作用元件核心序列上参与调控靶基因转录的蛋白质，有时也称转录因子。 2）结构：一般包括DNA结合域（螺旋-转角-螺旋、锌指结构、亮氨酸拉链和螺旋-突环-螺旋）、转录激活域，有的也包括蛋白互作结构域。 随着表观遗传学的发展，研究发现除了蛋白，DNA、RNA也有调控功能，所以现在也称反式调控元件。 3）分类 ②通用转录因子：普遍存在的转录因子，可识别启动子基本元件后形成转录复合体前体。 ③特异性转录因子：与基因表达的组织特异性有很大关系，能识别增强子或沉默子的转录调节因子。 ①RNA聚合酶； ④种类多样的协调因子：有的可以改变局部染色质的构像(如甲基转移酶)，对基因转录起始具有推动作用；有的和转录复合体前体结合促进转录复合体最终形成。 4）反式作用因子通过以下不同的途经发挥调控作用： 蛋白质和DNA互作；蛋白质和配基结合；蛋白质互作；蛋白质的修饰。 ①蛋白质直接和DNA结合 ◆ a -螺旋-转角-a -螺旋(HTH) ：有3个螺旋，螺旋3识别并和DNA结合，一般结合于大沟；螺旋1和2和其它蛋白质结合 。 ◆锌指结构：包括二个半胱氨酸及二个组氨酸族，其保守重复序列为Cys-N2-4-Cys-N12-14-His-N3-His。其中Cys和His残基与锌离子(Zn2+)形成的配位键，使氨基酸折叠成环，形成类似手指的构型。依靠指的N端与大沟结合。 ◆亮氨酸拉链：是一种富含亮氨酸的蛋白链形成的二聚体结构，这种特殊结构利于识别特殊的DNA序列。 ②蛋白质和配基结合（如激素) 调节蛋白先和配基结合被活化后进入细胞核，与特殊顺式元件结合促进转录。如甾类激素可以诱导某些基因表达。 激素控制果蝇幼虫唾腺染色体疏松区的变化： 现象举例：果蝇三龄前期：第三染色体不出现疏松区。三龄后期：第三染色体74区EF段、75区B段等出现疏松区。前蛹期：以上疏松区消失, 71区C-E段出现疏松区。成蛹期：71区C-E段疏松区消失，74区EF段、75区B段出现疏松区。 胸腺是产生蜕皮激素的地方，结扎试验导致以上疏松区的丧失说明蜕皮激素对疏松区开启的作用。 机理如前所述。 ③蛋白质之间的相互作用 酵母半乳糖基因的转录受一个长约17 bp的上游序列(UAS)调控，GAL4蛋白可以和UAS结合促进转录。 当半乳糖缺乏时， 尽管该蛋白仍然与DNA结合，但Gal80蛋白总是与Gal4蛋白活性域结合，不能激活转录； 当磷酸化的半乳糖与Gal80/Gal4蛋白复合体结合时，改变它们的构型，使Gal4p的活性中心外露，结果诱导gal基因表达。 四、转录后调控 1、mRNA的加工 （1） 5’端加帽 当RNA链合成达到30个核苷酸后，在其5’端加上一个7-甲基鸟嘌呤核苷的帽子，作用是在蛋白质翻译时帮助识别起始位置以及防止被RNA酶降解。 （2）3’端加尾 Pre mRNA 终止于3’末端的下游1-2 kb；然后由核酸酶切到离保守序列AAUAAA的下游11－30个核苷酸处；最后加上约200 bp的poly A尾巴。作用：增加mRNA的稳定性以及从细胞核向细胞质的运输。 (3) 内含子切除 2、选择性mRNA拼接 同一初级转录产物在不同的细胞中用不同方式进行拼接加工，形成不同的成熟mRNA分子，使蛋白质含量或组成上都可能不同。 3、RNA editing and RNAi 4、Control of RNA stability 真核生物的许多组织或细胞中，经转录的mRNA受抑制不能翻译成多肽，以失活的状态贮存（蒙面信使）。 举例： 如海胆卵内mRNA在受精前不能进行翻译，受精后的蛋白质合成速率猛增。原因：受精前的poly A过短，受精后加长后利于翻译。 植物种子在发芽的早期阶段，虽没有mRNA的合成，但有蛋白质的合成。 以上两例说明储存mRNA的存在。 mRNA的运输调控 真核细胞和原核不同，有一个核膜包被的核，实验表明约一半的蛋白编码基因的初始转录本一直留在核里面，然后被降解掉，只有与核孔复合体结合的RNA才能输出，现在不清楚mRNA是否需要一个特殊的输出信号。 2. 翻译过程的调控 翻译水平控制主要是受核糖体稳定性、新合成蛋白降解速率，和翻译过程中mRNA稳定性所决定，mRNA的寿命有的是几个月，有的只有几分钟。 五、翻译和翻译后