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植物组培复习总
第一章
植物细胞组培:在离体条件下利用人工培养基对植物器官、组织、细胞原生质体等进行培养,使其长成完整株体。
类型 1器官培养 2茎尖分生组织培养3愈伤组织培养 4细胞培养 5原生质体培养
植物组培特点:1培养条件可认为控制 2 生长周期短,繁殖率高 3管理方便,利用工厂化生产和自动化控制
植物细胞全能性:每个植物体细胞或性细胞都具有该植物的全套遗传基因,因此在一定条件下培养都可发育成一个与母体一样的植株。
植物细胞变现全能性必须经过的步骤:成熟细胞——分生细胞——胚状体——完整植株
成熟细胞——愈伤组织——出根出芽——完整植株
愈伤组织:原本指植物受伤后在表面形成的一团薄壁细胞。植物组培中特指人工培养基上形成的无数生长的薄壁细胞。
脱分化:已经完全分化定型的细胞,经过诱导成为重新恢复分裂能力的细胞的过程。
诱导细胞脱分化是处于抑制的,需要外接条件刺激,在各条件中,激素起重要作用。
4类植物 1有些植物只需生长素——IAA吲哚乙酸 NAA萘乙酸 2,4-D 如菊苣
2 有些仅需细胞激动素 萝卜 大豆
3 须加细胞激动素和生长素 烟草 胡萝卜 马铃薯
4不需加任何激素 烟草愈伤组织
再分化:植物成熟细胞经过脱分化后(形成愈伤组织后),由愈伤组织再形成完整植株的过程。
植物组培过程 取组织——形成愈伤组织——幼胚——植物幼体——成熟植株
脱分化 再分化
*以高度分化的动物体细胞的细胞核具有全能性
植物组培动物组培原理植物细胞全能性细胞增殖培养基性质固体培养基液体培养基培养基特有成分蔗糖、植物生长调节剂葡萄糖、动物血清培养结果植物植株细胞系、细胞株培养目的快速繁殖、培育无病毒植株等获得细胞或细胞分泌物植物组培发展简史
探索阶段 施莱登 施旺 创立细胞学说 提出理念
细胞学说要点1动植物均由细胞组成
2所有细胞来自其他细胞
3卵和精子是细胞
4单个细胞可分裂形成组织
5细胞遗传全能性;组培技术
哈勃兰特 成功培育出植物 提供理论基础
奠基阶段 怀特 配制出培养基 认识到维生素和植株激素在植物组培中的重要作用
崔徵 用不同种类和比例植物激素处理离体培养的烟草茎段和髓 发现腺嘌呤和生长素的比例是控制芽和根形成的主要条件之一
斯图尔特 证实哈波兰特50年前理论正确性
快速发展阶段 MS培养基 PEG原生质体融合法 植物遗传转化 体细胞无性系变异 人工种子
植物组培应用
1增加遗传变异性,改良作物
2繁殖植物
无性系:组培中从一个单细胞、一块愈伤组织、一个芽等器官都可获得无性系。无性系就是用植物体细胞繁殖所得的后代。
植物组培的无性系5种
原球茎 经原球茎形成植物 兰花
愈伤发生型 细胞或愈伤组织 通过不定芽形成植株 烟草愈伤组织
胚状体发生型 细胞或愈伤组织 通过胚状体 胡萝卜体细胞培养
器官型 离体茎 花芽等直接产生小植株 百合
无菌短枝扦插 腋芽,连同短枝经灭菌后 在无菌条件下培养,使其生根
3有用化合物的工业化生产
培养物低温贮藏和种质库的建立
生物科学的发展
三大成就 生苦克隆技术 基因工程 干细胞技术
植物基因工程技术发展对植物育种影响
核心DNA重组技术 T-DNA转化原理 植物细胞全能性
通过揭示T-DNA转化原理,改造Ti质粒并构建植物表达载体系统,诱导转基因细胞分化。发展最快领域。
克隆 广义 一个细胞个体无性繁殖 产生的后代
基因克隆 是指基于大肠埃希菌的DNA 片段(或基因)的扩增
过程 目标DNA的获得、重组载体的构建、受体细胞的转化以及重组细胞的筛选和繁殖
植物遗传转化:将外源基因转移到植物体内稳定的整合、表达与遗传的过程
先决条件 建立稳定高效的转化体系
主要方法 农杆菌法 基因枪法 花粉管通道法 显微注射法 电击法 聚乙二醇法
基因组学:最早指基因组作图和测序。后来经发展科学家定义为研究生物基因组的结构和功能的科学。分为结构基因组学和功能基因组学两大部分。
DNA分子标记 直接分子水平检测DNA差异 DNA水平上遗传变异的直接反应
现在有数十种
对植物育种影响 筛选分子标记,构建分子标记遗传图普,为植物育种,特别是数量性状遗传育种提供参考
第二章
基本设备:超净工作台
植物组培用具 培养基配置用具——烧杯 容量瓶 量筒 移液器
培养用具——试管 三角瓶 培养皿 封口膜
接种用具——酒精灯 镊子 喷雾器 解剖刀
用具洗涤——洗涤剂 酸洗 转基因废弃物必须灭菌
用具灭菌——干热灭菌 酒精灼烧 过滤 0.2um
小型器具——分注器 血球计数器 移液器 过滤灭菌器
常用仪器——酸度计 天平 磁力搅拌器 高压蒸锅灭菌器 干燥灭菌箱 离心机 电冰箱
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