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植物组织培养实验设计及 常用设备的使用与维护 实验目的 1.熟悉植物组织培养实验室的组成及设备 2.掌握植物组织培养实验室的设计要求 3.熟悉植物组织培养所需的仪器设备 实验原理 植物组织培养是通过无菌操作，在人工控制条件下进行培养以获得再生的完整植株或生产具有经济价值的其他产品的技术。要达到无菌操作和无菌培养，就需要人为创造无菌的环境，使用无菌的器皿及器械，同时还需要人工控制的温度,光照，湿度等培养条件。无菌环境和培养条件的创造需要一定的设施及设备。 三．实验步骤 1.实验室的设计要求 功能齐全、布局合理、环境清洁、易于灭菌 实验室的组成及功能 实验室的组成： 洗涤室、药品室、称量室、培养基配制室、灭菌室、接种室、 培养室、观察记录室、储藏室、移苗室 实验室的功能： 洗涤室用于玻璃器皿、实验用具的清洗、干燥、培养材料清洗、预处理也可在本室完成。室内应建造大型水槽和一个或几个浸泡池，水槽最好上一内衬白瓷片的水泥槽，为防止碰坏玻璃器皿，下面可铺一活动的橡胶板。备有晾瓶架，用于放置刷净的培养器皿，配备有一定数量的周转盘或小推车，用于运输培养器皿。地面要注意防滑，排水通畅，墙壁要有耐湿、防潮功能。 药品室用于存放各种药品试剂。室内要求干燥、通风，避免光照，配有药品柜、冰箱等设备。化学试剂物品分类存放于柜中，有毒物质如升汞需要专人密封保存。原药可室温下存放，配好的母液，宜置于4℃冰箱中保存。药品室紧邻称量室较好，便于工作。 称量室进行化学药品的称量。要求干燥、密闭，无直射光照，避免腐蚀性药品和水气直接接触。有固定的水磨石平台，安放普通天平、精密天平和分析天平，要有电源插座，最好设计在阴面的房间，这样对怕光药品的保存和称量有利，称量室紧邻培养基配制室较好，以方便配制母液和培养基。房间较少时，可以与药品室合二为一。 培养基配制室主要进行母液的配制，培养基的配制、分装、包扎和灭菌前的暂时存放。在条件允许下，面积宜大不宜小，室内应有大型实验台。配有电炉、锅子、量具、培养基分装器具、吸管、培养容器、水浴锅和酸度计等。如规模较小，可与洗涤室、灭菌室合并在一起。 灭菌室主要用于培养基和器皿的灭菌以及蒸馏水的制备。建筑上要求其墙壁耐湿、耐高温、墙壁上最好有排除蒸汽的排风扇。有用于灭菌锅的二相或三相电源、供水、排水设施齐全。配有干燥箱、高压蒸汽灭菌锅、蒸馏水器或纯水机以及摆放和存放器皿、培养基的架子和橱柜。灭菌室应邻近接种室，避免灭菌后的培养基长距离搬运，增加污染机会。 接种室主要进行植物材料的表面消毒、分离切割、转接，其无菌程度的高低对组织培养的成功与否起至关重要的作用。在工作方便的前提下，接种室面积宜小不宜大，一般小的无菌室5~7m2即可。平方易吸潮，容易引起污染，有条件的应选择楼房，最好在二层或二层以上，与其他区域隔离。接种室的天花板及四壁尽可能光滑平整，地面平坦无缝，便于清洗和消毒。一般安装滑动门，以减少开关门时空气的流动，在适当位置安装1~2支紫外线灯，用以辐射灭菌。室内干爽安静，清洁明亮，门窗紧闭，减少与外界空气对流，不存放与接种无关的物品，以免形成 紫外线无法照射到的死角。室内配有超净工作台、小推车、接种器械、酒精灯、酒精等。为减少接种人员进出时带入的杂菌，接种室外应设有缓冲室，供操作人员更换工作服、帽、鞋之用。为便于观察和参观，中间最好用玻璃墙隔离，接种室的门和缓冲室的门要错开，灭菌以2~3m2为宜。缓冲室最好也安装1支紫外线灯，用于环境的灭菌。 培养室是植物材料生长的场所。培养室应保持清洁，有光照、控温设备和定时设备，温度一般保持在（25±2）℃，光照强度1000~5000lx，光照时间8~26h/d，在实际工作中应根据不同的要求灵活掌握。 培养室主要用电调节温度和补充光照，用电量大。为节省能源，降低成本，其设计以充分利用空间和节省能源为原则。培养室可选两面采光，加大窗户，尽量考虑到利用自然光。采用双层玻璃以利隔热和防尘，培养室高度以比培养架略高为宜，墙壁要求有隔热、防火的性能。室内应保持整洁，切忌堆放无关物品。室内配有培养架、空调、药床等设备。 小的培养室容易控制温度、光照等环境条件，特别是培养材料较少时节能效果更为明显。培养室初次使用要用甲醛熏蒸消毒，培养期间要定期进行室内消毒工作。 观察记录室是对培养物的生长情况及实验结果进行观察、记录的场所。室内应有固定的水磨石台面，放置显微镜、解剖镜、显微照相等仪器，最好还应有一套制片和细胞学染色设备，进行制片或染色观察。室内应安静、清洁、明亮、保证仪器不振动、不受潮。 储藏室用于暂时不用的器