文献介绍 一种用来观察活细胞一氧化氮释放的两亲性荧光探针.pptVIP

Company Logo LOGO 一种用来观察活细胞一氧化氮释放的两亲性荧光探针 姓名: 专业：有机化学 学号： Topic:An Amphiphilic Fluorescent Probe Designed for Extracellular Visualization of Nitric Oxide Released from Living Cells Author:Hui-Wen Yao, Xiao-Yan Zhu, Xiao-Feng Guo, and Hong Wang Data:August 21, 2016 Journal:Analytical Chemistry 2016, 88, 9014?9021 文献信息 一氧化氮是一种胞内和胞间信使,参与许多生理和病理生理过程，对健康有着十分重要的影响。 小分子荧光探针加上荧光显微镜提供了优秀的实时原位检测的工具。然而,大多数探针只是反映细胞内一氧化氮的产生过程。为了可以观察活细胞向外部释放一氧化氮的行为,本文作者设计了一个两亲性荧光探针。 背景及意义 探针检测原理 如图所示，探针散布于细胞表面，随后由于探针上烷基的疏水作用和氨基的亲水作用，探针整齐的排列于细胞膜表面，当细胞释放NO时，探针可以实现迅速检测。 探针发光原理 邻苯二胺与一氧化氮反应生成苯并三氮唑，引发荧光猝灭的光诱导的电子转移作用被抑制，荧光团发光。 探针合成 探针性能：1、pH稳定性 黑线为DSDMHDAB，红线为DSDMHDAB-T 如图所示，DSDMHDAB在pH2-12范围内都很稳定，DSDMHDAB-T在酸性和中性范围内荧光强度较强，可用于生理条件下检测 探针性能：2、耐光性 黑线为DSDMHDAB，红线为DSDMHDAB-T 如图所示，DSDMHDAB和DSDMHDAB-T照射12h无明显变化，表明可适合于长时间检测 探针性能：3、NO浓度 荧光强度随NO浓度增长的变化 探针性能：4、响应时间 加入不同浓度NO时，探针的荧光强度随时间的变化 加入5μM NO时，不同浓度探针的荧光强度随时间的变化 5 探针性能：5、选择性 黑条表示的干扰物质加入10μM的DSDMHDAB时的荧光强度。灰条表示干扰物质加入NO后的荧光强度。 如图所示，该探针对于生物体内其它分子具有优良的选择性。 探针性能：6、细胞成像 用探针和NO处理后的小鼠巨噬细胞(A)和人类血管内皮细胞(B)的激光共聚焦显微镜成像。 加入10μM的DSDMHDAB后，用不同浓度的NO处理得问小鼠巨噬细胞的激光共聚焦显微镜成像，荧光强度随NO浓度增强 探针性能：7、细胞毒性 用不同浓度DSDMHDAB处理后，小鼠巨噬细胞的成活率。 如图表明，该探针的细胞毒性较低。 探针性能：8、活细胞释放NO的研究 (A)用5μM的DSDMHDAB处理后的小鼠巨噬细胞加入LPS和IFN前后的激光共聚焦显微镜成像，具有明显的荧光变化 (B)用5μM的DSDMHDAB处理后的人类血管内皮细胞加入JS-K前后的激光共聚焦显微镜成像，具有明显的荧光变化 （LPS、IFN和JS-K可刺激细胞产生NO） 总结 本文介绍了一种新颖的可以用于观察NO的细胞外释放的两亲性荧光探针DSDMHDAB。DSDMHDAB会自发和均匀的分布在细胞膜外,并且可以对细胞释放的NO实现迅速检测。DSDMHDAB在小鼠巨噬细胞和人类血管内皮细胞上荧光成像的成功应用表明其可以用来监控活细胞外的NO释放。 Company Logo LOGO