波谱解析课程—质谱分析离子化技术(PPT课件).pptVIP

概念 快原子轰击电离法是，用高速原子（离子）枪射 出的数kV的高速中性原子（Ar, Xe or Cs+离子）束对溶解在底物中的样品溶液进行轰击，产生 [M+H]+ or [M]+?等离子的电离法。 FAB法的关键之一是选择适当的（基质）底物， 从而,可以进行从低极性到较高极性的范围较广的有机化合物测定，是目前应用比较广的电离技术。 当高速中性原子轰击底物溶液后，在发生 ‘爆发性’汽化的同时，发生分子间冲突，离子—分子反应，从而，产生（解离性）氢质子转移反应[1]和[2]式及[3]式，与（电子轰击法相似）的轰击离子化反应[4]等. (M+B) + Afast ? [M+H]+ + [B-H]- + A [1] (M+B) + Afast ? [M-H]- + [B+H]+ + A [2] M + [B+H]+ ? [M+H]+ + B [3] (M+B) + Afast ? M+? + B + A + e- [4] M：样品分子 B：底物分子 Afast:高速原子（离子） 由上述四个主要反应可以看出，反应[1]、[2]、[4]亦是由于高轰击能量产生的，生成的离子具有高内部能量（甚至有些分子如C60分子可能有100ev），从而提供大量碎片信息。则有人研究认为产生的谱与EI相似，即‘EI-like’，只有[3]式是相似于CI的‘软电离’过程，即产生的谱图为‘CI-like’谱。因此，近来有人认为FAB法不属于‘软电离’技术。 由底物与粒子轰击（碰撞）诱导发生还原反应来产生[M+nH]+ (n?1),二聚体（双分子）[M+H+M]+ 及[M+H+B]+ 等 概述 概念 产生的离子 离子化过程 主要特点 大气压电离技术（atmospheric pressure ionization, API）顾名思义是一种常压电离技术，由于它不需要真空，减少了许多设备，使用方便。而且常压操作便于和其它分离技术如液相色谱和毛细管电泳联用，因而在近年来得到了迅速的发展，大大扩展了质谱仪分析化合物的范围，特别是在化学、生物、医学、药学、环境分析等领域获得了日益广泛的应用，是当今质谱界最为活跃的领域。 API技术包括电喷雾（ESI）和大气压化学电离（atmospheric pressure chemical ionization, APCI）两种离子化技术。 本节重点介绍ESI技术 ESI是一种‘软’电离技术，电喷雾原理的最早 发现可以追溯到1917年，而应用在质谱上是1984 年以后，80年代末开始逐渐被广泛重视。ESI技 术不仅在上述几大领域发挥着极大作用，在常规 化学、合成及天然药物分析方面也得到了广泛的 作用，尤其是解决了液相色谱与质谱离子源的接 口问题，从而‘真正’实现了LC-MS或LC-MS/MS 的联用技术。 概念 ESI是在液滴通过逐渐‘蒸发’产生离子发射的过 程中形成的，这种过程也称为“离子蒸发”。当 样品溶液由泵输送从毛细管流出的瞬间，在雾 化气（N2）、强电场（2～5kV）和近于大气压的干燥气体（N2）的作用下，溶剂在毛细管端口发生喷雾，产生高电荷的液体微粒（液 滴），所以称之为‘电喷雾’。 概念 随着液滴中溶剂的挥发液滴逐渐缩小，当电荷间的斥力克服了液滴的内聚力时，发生“库仑爆炸”（Coulomic explosion）。较小的液滴继续蒸发，电场增强，离子向表面移动，表面的离子密度越来越大，最终导致离子从表面蒸发，产生单电荷或多电荷离子。 产生的离子 当用正电场时，在ESI温和的条件下样品分子通常带上质子、碱金属离子或铵离子生成正离子的加合离子。 当用负喷雾电场时，通过除去质子或其它阳离子而生成负离子。 所带电荷的多少取决于所得的带正电荷或负电荷的分子中酸性或碱性基团的体积和数量。 通常小分子得到[M+H]+ 或[M-H]- 单电荷离子。而生物大分子产生z1的多电荷离子。 由于质谱仪测量的是质量电荷比（质荷比m/z），因此质量范围只有几千质量数的质谱仪，利用ESI法能够检测质量数十几万的生物大分子。 （1）在溶液中形成正负离子对 溶液中m个溶剂分子（B）与样品分子（M）在溶 剂和作用下，通过相对质子接受能力大小，以及 对应于 M的n个碱性部位或者酸性部位，可形成 以下正负离子对： mB + M (m-n) B + {n(B-H)- / (M+nH)n+ }