酵母双杂交RRS筛选系统对已知蛋白间相互作用的验证.pdfVIP

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2017-05-30 发布于浙江
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酵母双杂交RRS筛选系统对已知蛋白间相互作用的验证.pdf

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酵母双杂交RRS筛选系统对已知蛋白间相互作用的验证

重庆医科大学学报年第卷第期 ( ) 2008 33 2 JournalofChongqingMedicalUniversity2008.Vol.33No.2 — 133— 文章编号: ( ) 论著 0253-3626200802-0133-03 酵母双杂交RRS筛选系统对已知蛋白间相互作用的验证王琪张静田杰张晖 , , , 重庆医科大学附属儿童医院心血管内科重庆 ( , ) 400014 摘要目的通过一对已知蛋白和间的相互作用介绍酵母双杂交筛选系统以期将此系统更广泛的用于蛋白【】 : Pak Chp RRS , 间相互作用的研究方法挑选酵母温度缺陷株的低回复突变单克隆醋酸锂法制备酵母感受态细胞重组质粒。 : cdc25-2 , 。单独转化酵母排除诱饵蛋白的自激活作用将两重组质粒和共转 Met425-Myc-Ras-Pak , 。 Met425-Myc-Ras-Pak Ura-M-ChpAc 化酵母设置不同质粒组合和不同培养基平板作为对照观察酵母在的生长情况结果制备感受态的细胞无回 , , 36℃ 。 : cdc25-2 复突变发生质粒转化酵母后对细胞既无毒性也无自激活作用只有当能够表达两已知蛋白的重组质粒。 Met425-Myc-Ras-Pak 。共转化酵母并且在适合它们表达的培养基上细胞才能够在生长结论筛选系统正确验证了和 , , 。 :() cdc25-2 36℃ 1RRS Pak 间的相互作用可将其用于其它已知蛋白间相互作用的研究可以利用某已知蛋白构建诱饵通过筛选系统去寻 , 。() , Chp 2 RRS 找与已知蛋白相互作用的未知蛋白。关键词酵母双杂交系统恢复系统蛋白相互作用【】 ; ; Ras 中国图书分类法分类号文献标识码收稿日期【】Q3-3 【】A 【】2007-02-27 Testinginteractionbetweentwoknowproteinsbyrasrecruit