人教版年高一生物课题微生物的实验室培养页教学课件.ppt

二、常见消毒与灭菌方法的比较 内容 种类 主要方法 应用范围 区别 灭 菌 灼烧灭菌法 酒精灯火焰灼烧 微生物接种工具,如接种环、接种针或其他金属用具等,接种过程中试管口或瓶口等 强烈的理化因素,能杀死物体内外包括芽孢和孢子在内的所有微生物 干热灭菌法 干热灭菌箱160℃～170℃加热1 h～2 h 玻璃器皿(如吸管、培养皿等)、金属用具等不适合用其他方法灭菌而又能耐高温的物品 高压蒸汽灭菌 法 一般压力为100 kPa, 温度为121℃,维持 15 min～30 min 培养基等 种类 主要方法 应用范围 区别 消 毒 巴氏消毒法 70℃～75℃煮30 min或80℃煮15 min 牛奶、啤酒、果酒和酱油等不宜进行高温灭菌的液体 温和的物理、化学方法,杀死表面微生物营养体或抑制营养体繁殖,是部分灭菌 煮沸消毒法 100℃煮沸5 min～ 6 min(15 min～ 30 min水蒸气) 日常食品、罐装食品 紫外线消毒法 紫外线照射30 min 接种室、接种箱、超净工作台 化学药剂消毒 法 用体积分数为70%～75%的乙醇、碘酒涂抹,来苏水喷洒等 用于皮肤、伤口、动植物组织表面消毒,空气、手术器械、塑料或玻璃器皿消毒等 【思维拓展】(1)酒精消毒时,70%的酒精杀菌效果最好。原因是浓度过高,菌体表面蛋白质变性过快从而凝固成一层保护膜,乙醇分子不能渗入其中;浓度过低,杀菌能力减弱。 (2)具体选择消毒还是灭菌需要考虑:一是要考虑效果,灭菌的效果比消毒要好;二是要考虑操作对象的承受能力,活体生物材料、操作者的手等只能采用消毒,而不能灭菌。 【典例训练2】细菌培养过程中分别采用了高压蒸汽、酒精、火焰灼烧等几种不同的处理,这些方法依次用于杀灭哪些部位的杂菌(　　) A.接种针、手、培养基 B.高压锅、手、接种针 C.培养基、手、接种针 D.接种针、手、接种环 【解题关键】解决该题需明确:消毒→杀死部分微生物;灭菌→杀死所有微生物。二者采用的方法、程度不同决定了它们的适用范围不同。 【解析】选C。本题考查学生对无菌技术的掌握。高压蒸汽灭菌锅是灭菌的一个设备,通常用于培养基的灭菌。用酒精擦拭双手是消毒的一种方法。火焰灼烧,可以迅速彻底地灭菌,适用于微生物的接种工具,如接种针、接种环。 三、纯化大肠杆菌操作过程中的注意事项 1.平板划线法中几次灼烧接种环的目的: 灼烧时期 目　　的 取菌种前 杀死接种环上原有微生物 每次 划线前 杀死上次划线后接种环上残留的菌种,使下次划线的菌种直接来自于上次划线末端,使每次划线菌种数目减少,达到分离菌株的目的 接种 结束后 杀死接种环上残存的菌种,避免细菌污染环境和感染操作者 2.稀释涂布平板法操作比较复杂,且各个细节均需保证无菌操作,应特别注意: (1)酒精灯与培养皿的距离要适宜。 (2)吸管头不要接触其他任何物体。 (3)吸管要在酒精灯火焰周围使用。 (4)涂布器末端浸在盛有70%酒精的烧杯中,取出时,要让多余的酒精在烧杯中滴尽,然后将沾有少量酒精的涂布器在酒精灯火焰上引燃,注意防火。 【易错提醒】(1)在稀释涂布平板操作中,每个步骤都要注意无菌操作,以防培养基被污染,影响实验效果。 (2)每一稀释倍数菌液都至少要涂布三个平板,作为实验重复,求平均值,若其中有菌落数与其他实验差距悬殊者,应舍弃该实验数据,不进行统计、计算。 (3)平板冷凝后,皿盖上会凝结成水珠,凝固后的培养基表面的湿度也比较高,将平板倒置,既可以使培养基表面的水分更好地挥发,又可以防止皿盖上的水珠落入培养基造成污染。 【典例训练3】稀释涂布平板法是微生物培养中的一种常用的接种方法。下列相关叙述错误的是(　　) A.操作中需要将菌液进行一系列的浓度梯度稀释 B.需将不同稀释度的菌液分别涂布到固体培养基表面 C.不同浓度的菌液均可在培养基表面形成单个的菌落 D.操作过程中对培养基和涂布器等均需进行严格灭菌处理 【解题关键】解答该题需明确菌落的定义中菌落的来源、梯度稀释的目的以及防止杂菌污染的做法。 【解析】选C。若菌液浓度过大,形成的菌落连在一起,得不到单个的菌落。 专题2　微生物的培养与应用 课题1　微生物的实验室培养 一、培养基 1.概念:人们按照微生物对_________的不同需求,配制出供其 _________的营养物质。 2.种类: 营养物质 生长繁殖 液体 琼脂 3.营养组成:各种培养基一般都含有___、_____(提供碳元素的 物质)、_____(提供氮元素的物质)和无机盐,此外还需要满足 微生物生长对___、特殊营养物质(如维生素、氨基酸和碱基等) 以及_____的要求。 水 碳源 氮源 pH 氧气 二、无菌技术 1.关键:防止_________的入侵。 外来杂菌 2.消毒和灭菌: 比较项