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第一讲体外细胞培养20141

* * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * (1)待冻存细胞悬液的准备 (2)分级冷冻 (3)记录 二、冻存方法 细胞冻存方法 1.预先配制冻存液: 含20%血清培养基 10% DMSO 2. 取对数生长期细胞,经胰酶消化后,加入适量冻存液, 用吸管吹打制成细胞悬液(1×106 ~ 5 ×106细胞/ml) 3 .加入1ml细胞于冻存管中,密封后标记冷冻细胞名称和冷冻日期。 4年后,存洁率可达80%-100%。DMSO液用培养液配好, 避免因临时配制产热而伤害细胞。 三、冻存细胞的复苏 从液氮中取出后,立即投入到37~40℃温水中,溶解后尽快离心弃除冷冻保护液。 冷冻保存细胞之方法? 冷冻保存方法一: 冷冻管置于4 °C 30~60 分钟→ (-20 °C30 分钟*) → -80 °C 16~18 小时(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 长期储存。 冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 °C 至–80 °C 以下, 再放入液氮槽vapor

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