2014-9-血细胞超微结构-进修提高.pdf

血细胞超微结构与电镜诊断 —— 提高课程 Electron Microscope Department Ru Yongxin 茹永新 Part 1 电子显微镜原理与技术 Point 1 透射电镜原理 Point 2 电镜观察血细胞相关技术 Part 2 血细胞的超微结构 Point 1 细胞结构 Point 2 血细胞观察步骤 Point 3 血细胞发育过程与形态变化 PART 3 电镜在血液病诊断中的应用 Point 1 透射电子显微镜原理 高压电流→钨丝→发射电子→ 经过2个磁镜→电子束聚焦→平行穿过样品 物镜→中间镜和投影镜逐级放大→ 到达荧光屏或照相干版上。 透射电子显微镜成像原理：真空条件下，电子束经高压加速后，穿透样品时形成 散射电子和透射电子，它们在电磁透镜的作用下在荧光屏上成像。 透射电子显微镜 Measurement Unit 计量单位：1 mm=1000 μm; 1 μm=1000 nm; 1 nm =10A 放大倍率：人眼分辨力/光镜/ 电镜分辨力 0.2mm/0.5 μm/0.2nm=100万倍 透射电镜标本制备流程 Point 2 电镜观察血细胞相关技术 • 电镜细胞组化： 髓过氧化物酶（MPO） 血小板过氧化物酶（PPO） • 电镜免疫细胞化学 • 电镜原位杂交 电镜MPO 和PPO细胞组化 MPO用于鉴别ALL 和AML PPO用于诊断AML-M7 杂合白血病的诊断 AML-M 和M 诊断 0 1 判断髓系细胞分化程度 Part 2 血细胞超微结构 Point 1 细胞的超微结构 Point 2 血细胞观察步骤 Point 3 正常血细胞的发育与形态变化 Point 1 General cell ultrastructure 血细胞诊断结构 细胞外形及胞膜，丝足和片垂 核与核仁形状，常/异染色质比例 内质网，分泌泡，表面囊泡 颗粒形状和数量 初级颗粒：粒细胞 次级颗粒：粒细胞 Auer body(奥尔小体)：粒细胞 巨核细胞颗粒 单核细胞颗粒 Point 2 观察步骤 1. 先低倍总览：细胞外形、连结、排列。 2. 后高倍细勘：细胞内高尔基复合体、大小 泡、分泌颗粒、代谢产物、细丝、微管、 中心粒。 3. 核、核仁及它们的相关结构。 4 . 骨髓小粒要观察细胞与间质间关系。 Point 3 血细胞发育过程与形态变化 正常红细胞发育阶段和形态 原红细胞（proerythroblast） 早幼红细胞（basophilic normoblast） 中幼红细胞（polychromatic normoblast） 晚幼红细胞（orthochromatic normoblast ） 网织红细胞（reticulocyte） 原红细胞 proerythroblast or pronormoblast Giemsa染色胞 浆嗜碱，体积大 ，核圆，核仁不 明显，胞质比原 始粒和原始淋巴 细胞均匀染色深 。 proerythroblast or pronormoblast-EM 细胞直径14- 18um,原形或卵 原形，核占细 胞80%，核膜清 晰，核仁大， 线粒体大，Hb 含量少。 早幼红细胞 basophilic normoblast 直径12－17 um。胞浆核 糖体多，嗜碱 性强，甚至超 过原红细胞。 basophili