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中国试剂网 3.10.1.17 犬细小病毒抗原(CPV-Ag)酶联免疫分析（ELISA ） 试剂盒使用说明书 本试剂仅供研究使用 目的：本试剂盒用于测定犬血清，血浆及相关液体 样本中细小病毒抗原(CPV-Ag)的表达。 实验原理： 本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫法（ELISA ）测定标本中犬细小病毒抗原 (CPV-Ag) 。用纯化的犬细小病毒抗体包被微孔板，制成固相抗体，可与样品中细 小病毒抗原(CPV-Ag)相结合，经洗涤除去未结合的抗原和其他成分后再与 HRP 标记的细小病毒抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加 底物TMB 显色。TMB 在HRP 酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成 最终的黄色。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD 值），与CUTOFF 值相 比较，从而判定标本中犬细小病毒抗原(CPV-Ag)的存在与否。 试剂盒组成： 试剂盒组成 48 孔配置 96 孔配置 保存 说明书 1 份 1 份 封板膜 2 片（48 ） 2 片（96 ） 密封袋 1 个 1 个 酶标包被板 1 ×48 1 ×96 2-8℃保存 阴性对照 0.5ml ×1 瓶 0.5ml ×1 瓶 2-8 ℃保存 阳性对照 0.5ml ×1 瓶 0.5ml ×1 瓶 2-8 ℃保存 酶标试剂 3 ml ×1 瓶 6 ml ×1 瓶 2-8 ℃保存 样品稀释液 3 ml ×1 瓶 6 ml ×1 瓶 2-8 ℃保存 显色剂A 液 3 ml ×1 瓶 6 ml ×1 瓶 2-8 ℃保存 显色剂B 液 3 ml ×1 瓶 6 ml ×1 瓶 2-8 ℃保存 终止液 3ml ×1 瓶 6ml ×1 瓶 2-8 ℃保存 （20ml ×20 倍）×1 （20ml ×30 倍）×1 浓缩洗涤液 2-8 ℃保存 瓶 瓶 样本处理及要求： 1. 血清：室温血液自然凝固10-20 分钟，离心20 分钟左右（2000-3000 转/分）。 中国试剂网 3.10.1.17 仔细收集上清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。 2. 血浆：应根据标本的要求选择 EDTA 或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合 10-20 分 钟后，离心20 分钟左右（2000-3000 转/分）。仔细收集上清，保存过程中如有沉 淀形成，应该再次离心。 3. 尿液：用无菌管收集，离心20 分钟左右（2000-3000 转/分）。仔细收集上清， 保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。 4. 细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。离心 20 分钟左右 （2000-3000 转/分）。仔细收集上清。检测细胞内的成份时，用PBS （PH7.2-7.4 ） 稀释细胞悬液，细胞浓度达到 100 万/ml