细胞膜水通道.pptVIP

* 周桂梅 081300533 2016.04.04 水通道-研究背景 研究者介绍： 早在100多年前，人们就猜测细胞中存在特殊的输送水分子的通道。但直到1988年，阿格雷才成功分离出了一种膜蛋白质，之后他意识到它就是科学家孜孜以求的水通道。阿格雷于2003年被授予诺贝尔化学奖。诺贝尔奖评选委员会说，这是个重大发现，开启了细菌、植物和哺乳动物水通道的生物化学、生理学和遗传学研究之门。 水通道-研究背景 研究者介绍： 二十世纪八十年代中期，美国科学家彼得阿格雷研究了不同的细胞膜蛋白。经过反复研究他发现一种被称为水通道蛋白的细胞膜蛋白，就是人们寻找已久的水通道。为了验证自己的发现，阿格雷把含有水通道蛋白的细胞和去除了这种蛋白的细胞进行了对比试验，结果前者能够吸水，后者不能。为进一步验证，他又制造了两种人造细胞膜，一种含有水通道蛋白，一种则不含这种蛋白。他将这两种人造细胞膜分别做成泡状物，然后放在水中，结果的一种泡状物吸收了很多水而膨胀，第二种则没有变化。这些充分说明水通道蛋白具有吸收水分子的功能就是水通道。 2000年阿格雷与其他研究人员一起公布了世界第一张水通道蛋白的高清晰度立体照片，照片揭示了这种蛋白的特殊结构只能允许水分子通过。 1991年阿格雷发现第一个水通道蛋白chip28（28KD），chip28的m RNA能引起非洲爪蟾卵母细胞吸水破裂，已知这种吸水膨胀现象会被Hg 2+ 抑制。 水通道-研究背景 水通道介绍： 包括人类在内的各种生物都是由细胞组成的，细胞如同一个由城墙围起来的微小城镇，有用的物质不断被运进来，废物被不断运出去。早在一百多年前，人们就猜测细胞这一微小城镇的成墙中存在着很多“城门”他们只允许特定的分子或离子出入。 生物体的主要组成部分是水溶液，水溶液占人体重量的70%，生物体内的水溶液主要由水分子和各种离子组成，他们在细胞膜通道中的进进出出，可以实现细胞的很多功能。二十世纪五十年代中期，科学家发现细胞膜中存在着某种通道只允许水分子出入，人们称之为水通道。因为水对于生命至关重要，可以说水通道是最重要的一种细胞膜通道。 水通道-研究背景 水通道介绍： 水通道发现开辟了一个新的研究领域，目前科学家发现水通道蛋白广泛存在于动物、植物和微生物中。它的种类很多，仅人体内就有十一种。它具有十分重要的作用，比如在人的肾脏中就起着关键的过滤作用，通常一个成年人每天要产生170升的原尿，这些原尿经肾脏肾小球中的水通道蛋白的过滤，其中大部分是被人体循环利用，最终只有约一升的尿液排出人体。 目前在人类细胞中已发现至少11种此类蛋白被命名为水通道蛋白（aquaporin，AQP）。APQ0,APQ1，APQ2，APQ3，APQ4，APQ5，APQ6，APQ7，APQ8，APQ9，APQ10,类似APQ的蛋白质称为超水通道蛋白（APQ11，APQ12）. 水通道-结构描述 AQP1以四聚体的形式存在于细胞膜中， 每个亚基都能形成功能上独立的孔道。 序列分析表明， 它是一个6次跨膜的蛋白， N-端和C-端序列相似， 各具有一个保守的特征性序列Asn-Pro-Ala(NPA)[3](图1)。 AQP1具有4个半胱氨酸， 但突变研究表明， 仅仅一个(Cys-189)对汞离子敏感， 这个半胱氨酸靠近NPA序列， 位于水通道的孔道内。 水通道-结构描述 从AQP1的多肽中发现了四个半胱氨酸（87、192、152和189位）。每个半胱氨酸被取代为丝氨酸。比较卵母细胞的重组体中突变型和野生型AQP1对水的通透性。结果只有E环的残基没有被汞抑制。在B环的相应位置用一个半胱氨酸取代了丙氨酸，这个蛋白显示出了汞敏感的水通透性而在APQ1其他位置的置换未能导致这种现象的发生。这提示这一分子B环和E环的相应部分一定形成了沙漏样的水孔通道。六个跨膜螺旋表明他们围绕形成一个中心区域，包括B环从细胞质表面进入细胞膜，E环从细胞外进入细胞膜。APQ1的结构可以解释水通道在水的吸收和分泌两个运动方向上所起的作用。膜上处于反方向相对位置的B环和E环对构成功能性水选择通透十分重要。 水通道-结构描述 CHIP两端序列相互关联，B环（细胞内76-78位）和E环（细胞内192-194位）均有一个NPA模序（asparagine-protein-alanine）。E环的NPA靠近汞抑制点189位的半胱氨酸。B环和E环的重叠部分显示出他们形成一个单一的水的孔道向下穿过分子的中心，NPA的主要成分并列在一起成180度相联。APQ