大肠杆菌色氨酸生物合成途径关键酶的调控.pdfVIP

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2017-05-27 发布于天津
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大肠杆菌色氨酸生物合成途径关键酶的调控.pdf

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大肠杆菌色氨酸生物合成途径关键酶的调控.pdf

生物工程学报 Chin J Biotech 2008, May 25; 24(5): 844-850 Chinese Journal of Biotechnology ISSN 1000-3061 cjb@ © 2008 Institute of Microbiology, CAS CSM, All rights reserved 研究报告大肠杆菌色氨酸生物合成途径关键酶的调控研究 1 2 1 4 3 1 于金龙 , 王静 , 李剑欣 , 郭长江 , 黄英武 , 徐琪寿 1 军事医学科学院放射与辐射医学研究所, 北京 100850 2 河南中医学院基础医学院, 郑州 450008 3 中国人民解放军306 医院中心实验室, 北京 100101 4 军事医学科学院卫生学与环境医学研究所, 天津 300050 摘要: 为了通过基因工程手段提高大肠杆菌色氨酸产量, 对色氨酸生物合成途径中的关键基因 trpR 、tnaA 、aroG 和 trpED 进行了改造。首先通过敲除trpR 基因解除了基因组上色氨酸合成和转运关键酶受到的反馈阻遏调控, 进而又敲除了tnaA 基因, 阻断了色氨酸的分解代谢。然后, 将色氨酸合成途径的关键酶aroGfbr 和trpEDfbr 基因串联表达, 以去除色氨酸生物合成途径的瓶颈。与对照MG1655 相比, trpR 基因单敲菌色氨酸浓度提高了 10 倍, 双敲菌色氨酸浓度提高了约20 倍。pZE12-trpEDfbr 转入双敲菌后色氨酸浓度提高到 168 mg/L, 而将aroGfbr 和trpEDfbr 转入双敲菌后, 色氨酸浓度提高到820 mg/L。为构建色氨酸高产菌奠定了基础。关键词: aroG 和 trpED 共表达, trpR 和 tnaA 双敲除, 色氨酸 Regulation of Key Enzymes in Tryptophan Biosynthesis Pathway in Escherichia coli 1 2 1 4 3 1 Jinlong Yu , Jing Wang , Jianxin Li , Changjiang Guo , Yingwu Huang , and Qishou Xu 1 Institute of Radiation Medicine, Academy of Military Medical Science, Beijing 100850, China 2 School of Basic Medicine, Henan College of Traditional Chinese Medicine, Zhengzhou 450008, China 3 The Centre for Experiment